Proteum E 2015

PROTEUM E-2015
Avance 1
Equipo 1

Introducción
● La lisozima también es conocida como
muramidasa
● 14,4 kDa
● Rompe los enlaces beta 1,4 entre los residuos del
ácido N-acetilmurámico yN-acetil-D-glucosamina
en el peptidoglicano de las paredes celulares de
las bacterias gram-positivas.

Lisozima T4
- E. coli infectadas con el bacteriófago T4
producen la lisozima T4 -> Provoca la lisis de lacélula.
- Su producción es controlada por los genes del
bacteriófago T4.
- Ligando: HEPES/ 4-(2-hidroxietil)-1piperazinetanosulfónico

Aplicaciones
● Estudio de las interacciones genéticas con lasproteínas producto.
● Estudio y cristalización del GPCR.
● Modelo para la determinación de factores de
estabilidad y estructura proteica.

Justificación
-El ácido 4-(2-hidroxietil)-1piperazinetanosulfónicoes un buffer que
en interacción con la enzima
lisozima T4 le confiere mayor
estabilidad.
Ng et al (2003) realizaron un estudio en donde se determinó que las concentraciones de
lisozima permanecenestables hasta 3 meses cuando son almacenadas a -30°C. Después de
estos 3 meses las concentraciones fueron disminuyendo. El ensayo se realizó por 12 meses.

Estructura Lisozima-Ligando

LisozimaLigando

Sitio Activo

Interacción Enzima-Ligando

Energía de las distintas conformaciones

Conformación 1

Conformación 2

Conformación 3

Interacciones
Conferir
termoestabilidad:
● GLY113→ALA
●HIS31,LEU32→CYS

Referencias
Pantoliano, M. W., Ladner, R. C., Bryan, P. N., Rollence, M. L., Wood, J. F., & L., P. T. (1987). Protein engineering of subtilisin BPN':
enhanced stabilization through theintroduction of two cysteines to form a disulfide bond. Biochemistry, 2077-2082.
Wetzel, R., Perry, L., Baase, W., & Becktel, W. (1988). Disulfide bonds and thermal stability in T4 lysozyme. Proceedings OfThe
National Academy Of Sciences, 85(2), 401-405. doi:10.1073/pnas.85.2.401.
Ng, V., Koh, D., Fu, Q., & Chia, S. (2003). Effects of storage time on stability of salivary immunoglobulin A and...