Proteínas

Universidad Industrial de Santander



Laboratorio de bioquímica I







Determinación de proteínas






Camilo Andrés Arévalo Navarro, 2131388
Angie Paola Rueda Céspedes, 2131289







Marlon Yesid Caceres Ortiz










Bucaramanga


Diciembre 1 de 2015



MARCO TEÓRICO
Las proteínas son biomoléculas poliméricas lineales y están formadas por ά-L- aminoácidos, estas están presentes tantoen células animales como vegetales, se pliegan en una estructura tridimensional características de ellas la cual les suministra una gran cantidad de funciones. Desempeñan un papel importante como componentes estructurales y receptores moleculares. Ciertas proteínas se hacen presentes en procesos importantes como la replicacion, transcripcion y traduccion, al igual que pueden formar parte de laprimera línea de defensa de nuestro sistema. Pero hay un grupo con quizá mayor importancia como lo son las enzimas, que son claves en aspectos bioquímicos y regulan todo el metabolismo.

En cuanto a composición, las proteínas se clasifican en dos tipos, las simples o conjugadas. Las simples son aquellas proteínas que por hidrólisis producen únicamente μ- aminoácidos, y las conjugadas que además detener su cadena polipeptídica, contiene un grupo prostético el cual no es un aminoácidos, pero que puede ser un lípido, azúcar o un ión inorgánico. Además las proteínas se pueden clasificar por su forma, tenemos las de tipo fibrosas y las globulares. En las fibrosas o también llamadas escleroproteínas tienen funciones estructurales y se conocen por tener una dimensión mayor que las demás. Por otraparte, las globulares se caracterizan por tener enrollada sobre sí misma su cadena polipeptídica lo que da lugar a una estructura esférica.

Como datos a resaltar, las proteínas en las células son las moléculas con más abundancia, llegando a ocupar el 50 %, además son el principal nutriente en la formación de los músculos.


Tomada de :Biocomputacion y fisica de sistemas complejoshttp://oldwww.bifi.es/research/protein_ligand_inter/protein_ligand_inter_es.php


Un método de los más comunes e importantes en la identificación de proteínas y con el cual trabajamos en el laboratorio es el método de Biuret, el cual tiene su fundamento en la formación de un complejo coloreado entre el Cu2+ y los grupos NH de los enlaces peptídicos en medio básico. Cu2+ se acompleja con 4 NH. La intensidad decoloración es directamente proporcional a la cantidad de proteínas (enlaces peptídicos) y la reacción es bastante específica, de manera que pocas sustancias interfieren. Presenta un máximo de absorción a 540 nm. La sensibilidad del método es muy baja y sólo se recomienda para la cuantificación de proteínas en preparados muy concentrados (por ejemplo en suero).

METODOLOGÍA

Ensayo 1


Ensayo 2Ensayo 3





Ensayo 4




RESULTADOS

En el ensayo número 1 no se evidenciaron resultados.

Ensayo 2


Ensayo 3


Ensayo 4







ANÁLISIS DE RESULTADOS

En el ensayo número uno no se observó resultados, esto pudo deberse a que la caseína no estaba lo suficientemente concentrada como para reaccionar con el ácido acético. Se esperaba una reaccion de precipitacion cada vez más notable a medida que seaumentaba la concentración de ácido acético en cada uno de los tubos y a medida que transcurría el tiempo ya que el ácido disminuye el pH del medio cambiando el punto isoeléctrico de la proteína haciéndola precipitarse. Al precipitarse se pretendía observar menos turbidez en los tubos.

En el ensayo número dos, al tener la albúmina y hacerla reaccionar con el sulfato de cobre, el cobreinteracciona levemente con los pares de electrones no compartidos del nitrógeno que forman parte de los enlaces peptídicos observándose turbidez, pero al agregar sulfato de cobre en exceso se va a dar la reacción con más enlaces peptídicos presentes en la muestra formando así un halo azul turbio en la parte superior del tubo que indica una precipitación de este complejo. Además el cobre al ser un metal...