Proteómica comparativa de células madre embrionarias humanas y carcinoma embrionario

las células madre pluripotenciales embrionarias humanas (centros) puede diferenciarse in vitro en una variedad de células que mantener la promesa para la terapia de trasplante. Las células del carcinoma embrionario humano (CEC), células de teratocarcinomas humanas, son consideradas a una contraparte estrecha pero maligna humanos centros. En este estudio, un análisis integral de proteómicacuantitativa de centros y ECCs se llevó a cabo utilizando el método iTRAQ. Utilizando cromatografía líquida bidimensional y análisis de espectrometría de masas en tándem, identificamos y cuantificarse ~ 1.800 proteínas. Entre estos son proteínas asociadas con la pluripotencia y desarrollo así como empalmes apretados señalización y vía de receptor TGF beta. Exposición de casi 200 ~ proteínas > 2 doblediferencia en abundancia entre centros y CEC. Algunos ejemplos de marcadores del desarrollo tempranos altos en centros beta-galactoside-enlace lectinas (LGALS1), indiferenciado células embrionarias transcripción factor-1 (UTF1), citosina metiltransferasa 3 isoforma-B (DNMT3B) de ADN, antígeno de melanoma familiar-A4 (MAGEA4) y proteína transmembrana de interferón inducido-1 (IFITM1). En contraste,CD99-antígeno (CD99), factor de diferenciación crecimiento-3 (GDF3), ácido retinoico celular obligatorio proteína-2 (CRABP2) y del desarrollo de pluripotencia asociados-4 (DPPA4) estaban entre las proteínas altamente expresadas en CEC. Varias proteínas altamente expresadas en CEC como calientan choque 27 kDa proteína-1 (HSPB1), mitógeno-activado proteína quinasa quinasa-1 (MAP3K1), factor nuclearkappa polipéptido ligero enhancer de genes en células b inhibidor como-2 (NFKBIL2) y S100 calcio proteína-A4 (S100A4) también han sido atribuidos a malignidad en otros sistemas. Lo importante, inmunocitoquímica se utilizó para validar los análisis proteómico para un subconjunto de las proteínas. En resumen, este es el primer estudio a gran escala de proteómica cuantitativa de los centros humanos yECCs, que proporciona información crítica acerca de los reguladores de estas dos células estrechamente relacionadas, pero su desarrollo-distintas.

Introducción: pluripotentes células son células que pueden dar lugar a todo tipo de célula en el cuerpo. Se han aislado células pluripotentes de una variedad de fuentes humanas como modelos para estudiar el desarrollo humano temprano, así como para ladiferenciación in vitro en células de hematopoetic, cardiocytes, neuronas motoras y otros a efectos de la terapia de trasplante [1, 2]. Dos de los tipos celulares más estudiados incluyen células madre embrionarias (centros) derivadas de la masa celular interna del blastocisto escenifica embriones y células de carcinoma embrionario (CEC), las células madre de teratocarcinomas (mezclada de tumoresde células germinales) derivados de progenitores de la línea germinal [3]. Ambos de estos tipos de células comparten las propiedades generales de células pluripotentes en que exhiben auto-renovación ilimitada y puede dar lugar a derivados de las tres capas de germen embrionarios, como quedó demostrado por las masas embryoid en cultivo celular y en el desarrollo de tumores después de la inyecciónen ratones adultos. Así, teniendo en cuenta estos atributos, células pluripotentes pueden potencialmente proporcionar un número suficiente de células diferenciadas para tratar una amplia variedad de condiciones humanas, incluyendo enfermedades cardíacas, diabetes y muchos trastornos neurológicos.Sin embargo, varios obstáculos principales permanecen para ser superados si estas células se utilizanclínicamente. Lo más importante, estas células deben ser fácil y reproducible cultivadas y manipuladas para que poseen las características necesarias para la diferenciación de éxito, el trasplante y la injuria. Para ello, identificar los factores que intervienen en la supervivencia de células madre, proliferación y pluripotencia es crítica. Otro factor crítico se encuentra con su estabilidad...