proto y esferoplastos
Páginas: 2 (387 palabras)
Publicado: 8 de abril de 2013
PROTOPLASTOS Y ESFEROPLASTOS
Mediante procedimientos de laboratorio se puede lograr eliminar total o parcialmente la pared celular bacteriana. Se denominan protoplastos las células bacterianas alas que se ha desprovisto totalmente de pared celular, mientras que esferoplastos son aquellas células bacterianas que poseen restos de pared.
Obtención. Existen dos posibles métodos alternativos:1. Por destrucción del entramado del PG mediante enzimas líticas (lisozima, peptidasas). En el caso de bacterias Gram-negativas, previamente hay que desorganizar la membrana externa para hacerlapermeable a estas enzimas. Ello se logra usando el quelante EDTA y/o sometiendo las células a bajas temperaturas.
2. Por inhibición de la formación de nuevo PG en las células en crecimiento,tratándolas p. ej., con penicilina. Si se parte de un mutante auxótrofo para un componente del PG basta hacer crecer a la bacteria en un medio carente de dicho componente.
Estos métodos permiten:
En elcaso de Gram-positivas, la desorganización total de su pared, por lo que se obtienen protoplastos.
En el caso de las Gram-negativas, quedan restos de membrana externa y de peptidoglicano atrapadosen ella, por lo que se obtienen esferoplastos.
En ambos casos, protoplastos y esferoplastos pueden revertir a la forma normal eliminando el tratamiento (retirando la lisozima, o la penicilina).Protoplastos y esferoplastos son formas osmóticamente sensibles debido precisamente a que al no existir o estar desorganizado parcialmente el PG, ya no se pueden contrarrestar las fuerzas de presiónosmótica existentes en los medios hipotónicos en que normalmente se cultivan o suspenden las bacterias. Por lo tanto, si se quieren obtener suspensiones estables de estas formas, hay que obtenerlasen medios o soluciones isotónicos o ligeramente hipertónicos, para evitar su lisis:
Soluciones de NaCl 0,25-0,5 M;
Sorbitol o sacarosa 0,1-0,5 M;
Polietilénglicol (PEG) al 7,5%.
En estos...
Mediante procedimientos de laboratorio se puede lograr eliminar total o parcialmente la pared celular bacteriana. Se denominan protoplastos las células bacterianas alas que se ha desprovisto totalmente de pared celular, mientras que esferoplastos son aquellas células bacterianas que poseen restos de pared.
Obtención. Existen dos posibles métodos alternativos:1. Por destrucción del entramado del PG mediante enzimas líticas (lisozima, peptidasas). En el caso de bacterias Gram-negativas, previamente hay que desorganizar la membrana externa para hacerlapermeable a estas enzimas. Ello se logra usando el quelante EDTA y/o sometiendo las células a bajas temperaturas.
2. Por inhibición de la formación de nuevo PG en las células en crecimiento,tratándolas p. ej., con penicilina. Si se parte de un mutante auxótrofo para un componente del PG basta hacer crecer a la bacteria en un medio carente de dicho componente.
Estos métodos permiten:
En elcaso de Gram-positivas, la desorganización total de su pared, por lo que se obtienen protoplastos.
En el caso de las Gram-negativas, quedan restos de membrana externa y de peptidoglicano atrapadosen ella, por lo que se obtienen esferoplastos.
En ambos casos, protoplastos y esferoplastos pueden revertir a la forma normal eliminando el tratamiento (retirando la lisozima, o la penicilina).Protoplastos y esferoplastos son formas osmóticamente sensibles debido precisamente a que al no existir o estar desorganizado parcialmente el PG, ya no se pueden contrarrestar las fuerzas de presiónosmótica existentes en los medios hipotónicos en que normalmente se cultivan o suspenden las bacterias. Por lo tanto, si se quieren obtener suspensiones estables de estas formas, hay que obtenerlasen medios o soluciones isotónicos o ligeramente hipertónicos, para evitar su lisis:
Soluciones de NaCl 0,25-0,5 M;
Sorbitol o sacarosa 0,1-0,5 M;
Polietilénglicol (PEG) al 7,5%.
En estos...
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