Protocolo de determinacion de hongos y levaduras

Instituto Tecnológico Superior de Mascota

Protocolo
Determinación de hongos y levaduras
(Preparación, vaciado y cuenta.)

Presenta:
Alejandra Castillo Hernández

Diciembre de 2010

I.Introducción
El análisis del alimento y piensos para determinar la existencia, tipo y número de microorganismos es básico para la microbiología de alimentos. Sin embargo ninguno de los métodosutilizados habitualmente permite determinar el número exacto de microorganismos que existe en un determinado alimento.
Son cuatro los métodos básicos utilizados para investigar el número
“total” demicroorganismos:
1.- Recuento en placa (SPC) para la determinación del número de células
Viables
2.- Método del número más probable (MPN) de gérmenes como cálculo
Estadístico del número de célulasviables
3.- Técnicas de reducción de colorantes para el cálculo del número de células
Viables con capacidad reductora
4.- Recuento microscópico directo (DMC) tanto para células viables comoPara las no viables.
II. Objetivo General
Aprender a preparar, cultivar y contar número de células viables o unidades formadoras de colonias (u.f.c.) en un alimento.
III. Fundamento
Losrecuentos totales deben hacerse en función de uno de los siguientes factores:
* método de muestreo utilizado
* distribución de los microorganismos en la muestra
* naturaleza de la microflora del alimento
* naturaleza del alimento
* antecedentes del alimento
* adecuación nutricional del medio de cultivo
* temperatura y medio de incubación

* pH, aw, potencial deoxidación reducción del medio
* tipo de diluyente utilizado
* número relativo de microorganismos en la muestra

IV. Metodología
Vaciado en placa

V. Material:
Medios deCultivo:
* Agar para método estándar
* Agar Saboraut-Dextrosa Papa
* Agua Peptonada
* Agua Potable
* Agua Destilada
* Pipeta
* Balanza Analítica
* Matraz Erlenmeyer
*...