PROYECTO RIOS ROMERO SCOTT


UNIVERSIDAD POLITÉCNICA DE SINALOA
SAPPERE, DUBITARE ET INNOVARE



INGENIERÍA EN NANOTECNOLOGÍA



CUANTIFICACIÓN DE PROTEÍNAS DE MEMBRANA POR MEDIO DEL MICROSCOPIA DE FUERZA ATÓMICA
(AFM)

ANTEPROYECTO



RIOS ALCARAZ MARTHA GUADALUPE
ROMERO GUZMAN RUBI ESMERALDA
SCOTT LIZARRAGA WILLIAM NORBERT

“Que presenta”



BIOQUÍMICA



DENISSE ARELY ARELLANO ABURTO

Responsable de asignaturaMazatlán Sinaloa, 06 de julio del 2015

ÍNDICE

RESUMEN 4

ABSTRACT 4

I. INTRODUCCION 5

II. REVISION DE LITERATURA 6

I. CONTRIBUCIONES DE LA FÍSICA EN LA HISTORIA DE LA MICROSCOPÍA 6

II.PROTEINAS DE MEMBRANA 6
1) Proteínas integrales 6
2) Proteínas periféricas 6

III. FISIOLOGÍA DE LA MEMBRANA7
1) Gradiente electroquímico 7
2) Permeabilidad selectiva 7
a. Solubilidad en los lípidos 7
b. Tamaño 8
c. Carga 8
d. Canales 8
e. Transportadoras 8

IV. CARACTERIZACIÓN DE LAS PROTEÍNAS DE MEMBRANA 8

V. PURIFICACIÓN POR SDS-PAGE 9

III. JUSTIFICACION 11

IV. OBJETIVOS12

A. OBJETIVO GENERAL 12
B. OBJETIVOS ESPECIFICOS 12
V. MÉTODOS Y MATERIALES 13
VI. BIBLIOGRAFÍA 14


ÍNDICE DE FIGURAS

ILUSTRACIÓN 1. MICROSCOPIO DE FUERZA ATOMICA. 5

ILUSTRACIÓN 2. REGIONES HIDROFOBICAS Y GRUPOS CARGADOS EN UN SDS 9

ILUSTRACIÓN 3. Mecanismo de acción de un SDS 9

ILUSTRACIÓN 4. SDS-PAGE9



























RESUMEN
La microscopia de fuerza atómica (AFM) ha sido esencial en el desarrollo de la nanotecnología, para la caracterización y visualización de muestras a dimensiones nanométricas, sin embargo una variante de esta técnica ha sido desarrollada por los científicos para manipular moléculas biológicas una a una, uniendo la punta de la micro palanca(directamente, o atreves de otra molécula que actúa como puente) a uno de los extremos de la biomolécula estudiada (en este caso proteínas), esto para analizar como interaccionan las proteínas con otras moléculas presentes en una muestra de interés. Esta técnica nos permite medir y cuantificar la fuerza necesaria para desplegar los distintos dominios estructurales en los que se organizan ciertas proteínas,su elasticidad, resistencia mecánica y la fuerza que se requiere para deformarla o romperla. Un ejemplo el hallazgo del cristal 2D de LacY (operón requerido para el transporte y metabolismo de la lactosa en la bacteria Escherichia coli) representa un importante avance en el estudio de proteínas de membrana por AFM, ya que permitirá la manipulación y estudio directo de moléculas simples. Graciasa estos avances tecnológicos en la interface entre la nanotecnología y la bioquímica, diferentes laboratorios dentro y fuera de nuestro país van avanzando día a día en el conocimiento de los sistemas biológicos a nivel nanométrico. Un ámbito en el que la naturaleza aún guarda sus más íntimos secretos.
PALABRAS CLAVE: Nanotecnología, Proteínas, Cuantificar, AFM, Bioquímica.


ABSTRACT
TheMicroscopy atomic force (AFM) has been essential in the development of nanotechnology, to characterization and visualization of samples at nano dimensions, however a variant of this technique has been developed by scientists to manipulate biological molecules one by one, uniting the micro lever tip (directly, or through another molecule that acts as a bridge) to one end of the biomolecule studied (in thiscase proteins) , this is to analyze how interacting proteins with other molecules present in a sample of interest. This technique allows us to measure and quantify the force necessary to deploy the different structural domains are organized in which certain proteins, its elasticity, mechanical strength and the force required to deform it or break it. An example of Crystal LacY 2D find (operon...