Prueba Agar Hierro Kliger

Prueba con Agar Hierro Kliger
Medio de cultivo frecuente usado en microbiología de alimentos para la diferenciación de enterobacterias, en base a la fermentación de glucosa y lactosa, y a laproducción de ácido sulfhídrico
Fundamento: En el medio de cultivo, la peptona de carne y la tripteína, aportan los nutrientes adecuados para el desarrollo bacteriano. La lactosa y la glucosa son loshidratos de carbono fermentables. El tiosulfato de sodio es el sustrato necesario para la producción de ácido sulfhídrico, el citrato de hierro y amonio, es la fuente de iones Fe 3+, los cuales se combinancon el ácido sulfhídrico y  producen sulfuro de hierro, de color negro. El rojo de fenol es el indicador de pH, y el cloruro de sodio mantiene el balance osmótico. El agar es el agente solidificante.Por fermentación de azúcares, se producen ácidos, que se detectan por medio del indicador rojo de fenol, el cual vira al color amarillo en medio ácido. El tiosulfato de sodio se reduce a sulfuro dehidrógeno el que reacciona luego con una sal de hierro proporcionando el típico sulfuro de hierro de color negro.
Procedimiento:
1. Inocular el tubo con una asa recta, haciendo una picadura hasta elfondo del tubo y a continuación una siembra en estrías en la superficie del pico de flauta
2. Incubar a 37° C durante 24 horas
3. Realizar la lectura observando el viraje del indicador ( amarillo:acidez; fucsia: alcalinidad); precipitado negro (producción de SH₂ y fractura o desplazamiento del agar (producción de gas)

Interpretación de resultados:
La presencia de la coloración negra indicaque la bacteria ha realizado una respiración anaerobia utilizando tiosulfato como aceptor final de electrones. El tiosulfato es transformado en SH₂ que con el citrato férrico amónico origina Fe₂S₂ decolor negro


Determinacion de exoenzimas: Amilasa
Hidrólisis del Almidón
Permite comprobar qué bacterias producen amilasa y son, por tanto, capaces de utilizar el almidón como nutriente,...