prueba de citrato

Prueba de citrato
l. Principio
Determinar si un organismo es capaz de utilizar el citrato como única fuente de carbono para el metabolismo y el crecimiento con alcalinidad resultante
ll. Objetivo
El citrato es parte del grupo de pruebas de indol-rojo de metilo-voges-proskauer-citrato (IMViC) para la identificación de la familia enterobacteriaceae, de microorganismos gramnegativosrelacionados y de bacterias no fermentadoras.
A. Ayuda a diferenciar entre géneros en especial entre los miembros de la familia enterobacteriaceae.
1. Escherichia coli (por el género -) y especies de shigella(-) de mayor parte de las otros microorganismos de la familia de la Enterobacteriaceae encontrados encontrados con frecuencia (cuadro7-1)
2. Edwardsiella (-) de salmonella (por lo general +).3. Serratia proteamaculans (antes Serratia liquefaciens)(+) de yersinia pseudotuberculosis (-) y yersinia enterocolitica (por general(-) ; Serratia proteamaculans subesp. Proteamaculans (antes Serratia liquefaciens) es un conjunto de diversos grupos por hibridación de DNA que incluye S. proteamaculans y Serratia grimesii (16).
4. Grupos Klebsiella – Enterobacter (por lo general +) de E. coli(por lo general -).
5. Proteus rettgeri (antes koserella trabulsii) (+) de hafnia alvei (-).
6. Yokenella regensburgei (antes koserella trabulsii) (+) de hafnia alvei (16).
B. Ayudar a la diferenciación las especies.
1. Leminorrella grimontii (+) de Leminorrella richardii (16).
2. Acidovorax delafieldii (+) de A. facilis (-) y A. temperans(-).


lll. Bioquímica.
La energía puede serproporcionada a algunas bacterias en ausencia de fermentación o producción de ácido láctico (15,20) por la utilización de citrato como una fuente de carbono. En condiciones normales el metabolismo del citrato involucra una condensación de acetilo con coenzimas A y oxalacetato (15) para ingresar en el siclo de Krebs. El metabolismo del citrato por la mayoría de las bacterias es rápido por la vía delácido tricarboxilico o el cambio metabólico de la fermentación del citrato (20). Los microorganismos que poseen un mecanismo de transporte o permeasa permiten q el citrato penetre al interior de la célula (25). En las bacterias el desdoblamiento del citrato involucra un sistema enzimático sin la participación de la coenzima A, la citratasa (citrato oxalacetato liasa) (25) o el citrato desmolasa(15). La citratasa requiere un catión divalente para su actividad, magnesio o manganeso (23). Antes se consideraba que la degradación inicial del citrato producía oxalacetato ( la sal del ácido oxalacetico)y acetato ( la sal de ácido acético) (15). ahora conocidos por ser los intermediarios en el metabolismo del citrato (15).


Los productos del metabolismo del citrato dependen del pH delmedio (12,15). A un pH alto (alcalino), se producen mas acetato y formato y disminuye la producción de lactato y CO2 (12,15). A un pH por encima de los 7.0 no existe la producción de lactato y los productos son (12,15):

A un pH acido, los principales productos del metabolismo del citrato son acetilmetilcarbinol (acetoina) y lactato (12,15). Sin tener en cuenta los productos finales producidos,el primer paso metabólico en la fermentación del citrato produce piruvato. La degradación del piruvato depende entonces del pH del medio (5,14).



El medio para la fermentación del citrato también contiene sales inorgánicas de amonio. Un microorganismo que puede utilizar el citrato como su única fuente de carbono también utiliza las sales de amonio como su única fuente de nitrógeno (16). Lassales de amonio (p.ej., fosfato de amonio) son degradadas a amoniaco (NH3), lo cual aumenta la alcalinidad. Las bacterias extraen el nitrógeno de las sales de amonio con producción de amoniaco (NH+3),lo que conduce ala alcalinización del medio y a la conversión de NH23+a hidróxido de amonio (NH4OH)(16).
Deffner y franke (9,10) mostraron q el citrato utilizado por enterobacter aeregenes...