Prueba de ELISA e inmunofluorescencia

INTRODUCCIÓN
Prueba de ELISA
El examen de ELISA es una de las pruebas más eficaces para detectar el virus del VIH.
Se realiza en las enzimas y su nombre viene del término inglés "Enzyme-linkedimmunosorbent assay", que quiere decir “ensayo inmonoenzimático ligado a enzimas".
Es una técnica de inmunoensayo en cual un antígeno inmovilizado se detecta mediante un anticuerpo enlazado a una enzimacapaz de generar un producto detectable como cambio de color o algún otro tipo; en ocasiones, con el fin de reducir los costos del ensayo, nos encontramos con que existe un anticuerpo primario quereconoce al antígeno y que a su vez es reconocido por un anticuerpo secundario que lleva enlazado la enzima anteriormente mencionada. La aparición de colorantes permite medir indirectamente medianteespectrofotometría el antígeno en la muestra.
Se usa en muchos laboratorios para determinar si un anticuerpo particular está presente en la muestra de sangre de un paciente. Aunque el procedimiento esrutinario y sencillo, involucra a un gran número de variables, tales como selección de reactivo, temperatura, medición de volumen y tiempo, que si no se ajustan correctamente, puede afectar los pasossucesivos y el resultado de la prueba.
Otras pruebas de laboratorio para confirmar la presencia de anticuerpos del VIH, incluyen la inmunoelectrotransferencia o examen de Western Blot, lainmunofluorescencia y la radioinmnoprecipitación o RIPA.
Prueba de inmunofluorescencia
La inmunofluorescencia es una técnica de inmunomarcación que hace uso de anticuerpos unidos químicamente a una sustanciafluorescente para demostrar la presencia de una determinada molécula. Es una técnica que tiene variantes cuali y cuantitativas, por ejemplo FPIA dentro de las cuantitativas y la inmunotinción de célulaspara su observación por microscopía fluorescente dentro de las cualitativas.
La inmunofluorescencia, como técnica de tinción, puede ser utilizada en cortes de tejidos, líneas celulares cultivadas,...