PRUEBA DEL INDOL

PRUEBAS IMViC

- Material auxiliar para todas las pruebas:Tubos de ensayo con el medio o el diluente, esterilizados
Asa Kolle esterilizada (mechero de alcohol o Bunsen)

PRUEBA DEL INDOLFundamento:
El indol es uno de los productos de degradación metabólica del aminoácido triptofano. Las bacterias que poseen la triptofanasa son capaces de hidrolizar y desaminar el triptofano conproducción de indol, ácido pirúvico y amoníaco. La producción de indol es una característica importante para la identificación de muchas especies de microorganismos. La prueba de indol está basada en laformación de un complejo rojo cuando el indol reacciona con el grupo aldehído del p-dimetilaminobenzaldehído. Este es el principio activo de los reactivos de Kovacs y Ehrlich. El medio de cultivo utilizadodebe ser rico en triptofano:

Material y reactivos:
Agua de peptona tamponada
Reactivo de Kovacs

Procedimiento:
Inocular el agua de peptona tamponada con el organismo en estudio e incubar a latemperatura propicia para el microorganismo de 24 a 48 horas. Al finalizar este período, añadir 1-3 gotas de reactivo de Kovacs por la pared interior del tubo.

Resultados:
(+): Desarrollo de unindol de color rojo fucsia intenso en la superficie , y como mínimo debe permanecer de 20 a 30 segundos.
(-): Aparición de un indol de color amarillo, o sin cambio de coloración del medio.Observaciones:
- Temperatura de incubación del agua de peptona tamponada: 37ºC para la mayoría de bacterias. 44°C en el caso de E. Coli.

PRUEBA DEL ROJO DE METILO

Fundamento:
Una de lascaracterísticas taxonómicas que se utilizan para identificar los diferentes géneros de enterobacterias lo constituyen el tipo y la proporción de productos de fermentación que se originan por la fermentación de laglucosa. Se conocen 2 tipos generales: La fermentación ácido-mixta y la fermentación del 2,3 butanodiol. En la fermentación ácido mixta se forman fundamentalmente láctico, acético y succínico,...