Prueba elisa
granulosus en muestras de suero o plasma humano
SIGNIFICADO CLINICO
CELQUEST HIDATIDOSIS ELISA
Ensayo inmunoenzimático para la detección de
Anticuerpos IgG anti Echinococcus granulosus
El liquido hidatico (LH) esta constituido por una compleja mezclade glicoproteínas y lipoproteínas, hidratos de carbono y sales minerales. Algunos de sus componentes provienen del huésped (principalmente albumina e inmunoglobulinas), mientras que el resto son producto de la actividad metabólica del metacestodo. Históricamente, el LH es la fuente de antígenos mas importante para el inmunodiagnostico de la hidatidosis humana.
La hidatidosis humana es unazoonosis parasitaria causada por el estadio larvario del cestodo E. granulosus (familia
Taeniidae). Es una enfermedad parasitaria donde el hombre es el huésped intermediario, por lo que el parasito desarrolla
Formas quísticas en el.
FUNDAMENTOS DEL ENSAYO
COMPONENTES
El material unido de forma no especifica sera eliminado por medio del lavado. Durante la incubacion con el conjugado, losanticuerpos anti-IgG humana marcados con peroxidasa, se uniran al complejo formado. Finalmente en la etapa de incubacion con el sustrato cromogenico, la peroxidasa unida al complejo producira una coloracion, que permitira detectar las muestras reactivas al E. granulosus. La reaccion enzimatica será detenida por la adicion de acido sulfurico, midiendose enseguida la intensidad de color con un lectorcolorimetrico para placas de ELISA.
es un ensayo inmunoenzimatico en fase solida para la detección cualitativa de anticuerpos contra el E. granulosus. Se realiza en placas cuyos pocillos son sensibilizados con un antígeno purificado a partir de liquido hidratico. Si las muestras analizadas contienen anticuerpos específicos para E. granulosus estos formaran un complejo estable con los antígenosque recubren los pocillos.
Solución | Descripción |
Solución de lavado (concentrado 25x) | Frasco con 60ml de solucion tampon, pH 7.2. Contiene Tween 20. |
Diluyente de muestras | Frasco con 30ml de solucion tampon, pH 7.2. Contiene Tween 20, BSA y aditivos |
Conjugado anti-IgG | Frasco con 15ml de solucion de conjugado Anti-IgG (cabra) marcado con peroxidasa enbuffer Tris yestabilizantes. |
Sustrato | Frasco con 15ml de Tetrametilbenzidina (TMB) y peroxido de hidrogeno. Es un reactivomuy sensible a la luz y no debe ser utilizado si presenta un aspecto turbio o color azul. |
Control positivo alto | Frasco con 200 ml de suero humano positivo para Hidatidosis. Contiene Azida de Sodio |
Control negativo | Frasco con 200 ml de suero humano negativo para Hidatidosis.Contiene Azida de Sodio |
Solución de frenado | Frasco con 10ml de solución de Acido sulfurico (H2SO4) 2N. En caso de contacto conpiel o mucosas, lave la zona afectada con abundante agua. |
- Una placa de ELISA para 96 determinaciones, sensibilizada con antigeno purificado a partir de liquido hidatico. Cada
placa esta compuesta por 12 tiras de 8 pocillos que pueden ser utilizadas individualmentey es proporcionada dentro
de un embalaje herméticamente cerrado, que contiene un desecante en su interior.
- Sello autoadhesivos para cubrir los pocillos
- Bolsa autosellante.
- Las soluciones que componen el kit son detalladas en la tabla.
- Las muestras que contienen precipitados o coágulos deben ser centrifugadas a 2500 rpm por 10 minutos antes del
Análisis. Advertencia: no utilizarmuestras con contaminación microbiana pues pueden producir falsos resultados.
CELQUEST HIDATIDOSIS ELISA puede ser utilizado con muestras de suero o plasma humano.
- Los anticoagulantes presentes en las muestras como EDTA, oxalato, heparina o citrato, no afectan los resultados del ensayo.
Todos los reactivos y componentes deben estar a temperatura ambiente en el momento de ser usados y deben...
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