prueba reactivo de Biuret

1. OBJETO Y CAMPO DE APLICACIÓN.
El objetivo de este ensayo es investigar la, presencia de enlaces peptídicos los cuales son uniones especificas entre los aminoácidos.
El campo de aplicación de este ensayo podría ser en laboratorios de alimentos, productos agrícolas o todos aquellos en los que se quisiera identificar la presencia de aminoácidos en muestras biológicas.

2. REFERENCIAS A LANORMA.
Todas las normas e instrucciones fueron proporcionadas por el guión de práctica dado por el profesor.

3. DEFINICIONES.
Reactivo de Biuret: Aquel que detecta la presencia de proteínas, péptidos cortos y otros compuestos con dos o más enlaces peptídicos en sustancias de composición desconocida.

4. FUNDAMENTOS.
Existen varias pruebas para la cuantificación de proteínas de muestrasbiológicas. La elección del método depende de varios factores, uno de ellos es la cantidad de proteínas en la muestra. En muestras donde la cantidad es mayor, una prueba de elección es la de Biuret.

La prueba de Biuret sirve para investigar la presencia de enlaces peptídicos, los cuales son uniones especificas entre loa aminoácidos. Se basa en la formación de sales complejas de color violeta alañadir sulfato cúprico en solución alcalina. El complejo está formado por enlaces de coordinación, donde los pares electrónicos proceden de los grupos amino de los aminoácidos de la cadena polipeptídica. El reactivo, de color azul, cambia a violeta en presencia de proteínas, y vira a rosa cuando se combina con polipéptidos de cadena corta.
La reacción del Biuret no es una reacción específica paraproteínas. Eso hace que un resultado positivo con este reactivo deba ser cuidadosamente evaluado para descartar los resultados falsos positivos.
Un resultado negativo de la reacción del Biuret sobre una muestra problema no necesariamente indica la ausencia de proteínas, ya que puede ocurrir:
a) Que no existan proteínas o péptidos en la muestra (ni tampoco otras sustancias no proteicas Biuretpositivas).
b) Que existan una o más sustancias interferentes en la muestra que impidan que se produzca la reacción (lo que daría lugar a un resultado falso negativo). Esto puede descartarse (o evitarse) si conozco de antemano la composición aproximada de la muestra.
c) Que existan péptidos, pero a una concentración inferior al límite de sensibilidad del método. Todo método permite determinar lapresencia de un compuesto sólo si la concentración del mismo es superior a cierto valor.









5. IDENTIFICACIÓN DE LA MUESTRA.
La identificación del huevo utilizado es la siguiente:
• Centro: Supermercado GADIS.
• Denominación comercial: Yema de oro.
• Categoría: A.
• Clase: M.
• Peso: 53-63g.
• Datos empresa: Av. Maestro M.Gómez nº8
• C.E: es1400268.
• Finca: Xian, 27,Trole 15885 Vida (A Coruña)

6. CONDICIONES DEL ENSAYO.
Este ensayo o práctica, se realizo en el laboratorio en donde las condiciones de temperatura, presión, etc... eran las propias de un laboratorio.

7. REACTIVOS Y MEDIOS DE CULTIVO.
Fenilalanina (1%):
• C9H11NO2.
• M: 165.19g/mol
• Calidad: PB25g PA.
• Lote: 0000179264.

Reactivo de Biuret:
• Composición:
Copper (II) Sulphate5-hydrate (1,5g).
Sodium and Potassium (4,5g).
Tartrate 4-hydrate (0,5g).
Potassium iodide 80,8g).
Water sqm (100mL).

• V=100mL.
• Calidad: DC.
• Lote: 0000219446.
• PANREAC QUIMICA-SAU.

Albumina:
• Se obtuvo de la clara del huevo.
Agua destilada.

(En este ensayo no se realizo ningún medio de cultivo.).

8. APARATOS O EQUIPOS.
• Tubos de ensayo.

• Vaso de precipitados.• Pipeta Pasteur.

• Soporte para tubos de ensayo.


9. DIAGRAMA DE FLUJO.







































10. CÁLCULOS Y EXPRESIÓN DE LOS RESULTADOS.
En este ensayo no se ha realizado ningún cálculo.

Los resultados obtenidos fueron los siguientes:

Tubo Agua destilada Fenilalanina al 1% Albúmina de huevo Reactivo de Biuret Resultado...