PRUEBAS BIOQUIMICAS

PRUEBAS BIOQUIMICAS


AUTORES  
Beltrán M. Vanessa Anggy 
Castañeda R. Kelly Tatiana 
  

FECHA DE ENTREGA: 22/10/2014 
  

OBJETIVOS 

Identificar algunos géneros de bacterias mediante el uso de medios selectivos
Realizar pruebas bioquímicas para las bacterias sembradas
Efectuar siembra de bacterias en los diferentes medios de cultivos


PALABRAS CLAVES

Pruebas bioquímicas,siembra, bacterias, medios selectivos y macroscópicos.

  
RESUMEN

En la práctica del laboratorio se realizo siembra de bacterias en nuevos medios selectivos con el debido proceso de estrías, seguido de la aplicación de las pruebas bioquímicas para una sola de las bacterias sembradas, en nuestro caso Klebsiella pneumoniae. Los resultados expuestos en el trabajo fueron registrados por unperiodo de 8 días para la siembra y de 24 y 48 horas para las pruebas.

INTRODUCCION 

Las pruebas bioquímicas han sido ampliamente utilizadas para diferenciar bacterias. Estas pruebas se fundamentan en demostrar si el microorganismo es capaz de fermentar azucares, la presencia de enzimas, la degradación de compuestos, la producción de compuestos coloreados, etc. Aun bacterias fuertementerelacionadas pueden separarse en dos especies diferentes con base a pruebas bioquímicas.

El tiempo necesario para la identificación de bacterias puede reducirse considerablemente con el uso de sistemas miniaturizados basados en pruebas bioquímicas. Estas herramientas que permiten reducir el tiempo de reporte, en primer lugar fueron elaborados para bacterias de importancia medica, tales como lasenterobacterias.




Los medios selectivos son usualmente medios de agar básico, o enriquecidos, a los cuales se les han agregado ciertos reactivos que impiden el crecimiento de la mayoría de las bacterias, permitiendo por lo tanto el aislamiento de unas cuantas, seleccionadas en los especímenes que contengan grandes números de organismos indeseables.

Otras clasificaciones de los medios decultivo son las siguientes:

De acuerdo a la consistencia

Medios sólidos. Son útiles para el crecimiento, aislamiento y obtención de cultivos puros de bacterias y hongos.

Medios semisólidos. Útiles para la observación de metabolismo, así como la propagación y obtención de cultivos de bacterias anaeróbicas.

Medios líquidos. Permiten la difusión del microorganismo

PRUEBA DE UREA

Mediode cultivo: Agar urea de Christensen
Composición: Peptona, Cloruro de sodio, Fosfato monopotásico, Glucosa, Urea, Agar, Agua destilada.
Indicador de pH: Rojo de fenol
Ácido: Amarillo (pH = 6.8)
Alcalino: Rojo rosado (pH = 8.4)
Medio no inoculado: Amarillo (pH = 6.8)
Fundamento: Determina la capacidad de un organismo de desdoblar laurea formando dos moléculas de amoniaco por la acción de laenzima ureasa produciendo un cambio de color rojo en el medio. La hidrólisis de la urea es catalizada por la ureasa, para dardos moléculas de amoniaco. La ureasa es una importante enzima microbiana vinculada con la descomposición de los compuestos orgánicos.




Consistencia del medio: Sólido en pico de flauta (cola de pescado)
Inoculación: Estría en pico de flauta (no hacer punción).Condiciones de incubación: Tiempo: 18-24 horas. Temperatura: 35-37° C
Resultados:




Interpretación:
Positivo: Rojo rosado intenso en el pico de flauta
Negativo: Amarillo

Aplicaciones: Se usa para diferenciar los organismos Proteus rápidamente ureasa positivos de otros miembros de las enterobacterias, otros géneros pueden ser positivos retardados.

Klebsiella (+) 
Escherichia coli (-)Proteus (+ rápido)
Providencia (-)

PRUEBA DE TSI

Medio de cultivo: Agar hierro triple azúcar (agar hierro de Kligler, AHK)
Composición: Extracto de carne, Extracto de levadura, Peptona, Proteasa, Lactosa, Dextrosa, Sulfato ferroso, Cloruro de sodio, Tiosulfato de sodio, Agar, Agua destilada.
Indicador: Rojo de fenol
Ácido: amarillo
Alcalino: rojo
Medio no inoculado: naranja rojizo...