Pruebas bioquimicas

KLIGLER
Es un medio de cultivo utilizado para la identificación de enterobacterias, en función de su capacidad para:
Fermentar glucosa
Fermentar lactosa
Producir gas a partir de la fermentación
Producir hidrógeno sulfurado
Es un medio que contiene peptona de carne y tripteína que suministran los nutrientes necesarios para el desarrollo de las bacterias. También contiene lactosa y glucosacomo carbohidratos fermentables. El rojo de fenol es el indicador de pH que vira el medio a color amarillo ante la producción de ácido (pH debajo de 6,8) producto de la fermentación de la glucosa o la lactosa, en medios alcalinos (por encima de 8,2) se torna rojo.
También contiene tiosulfato de sodio como sustrato para la producción de ácido sulfhídrico; citrato de hierro y amonio como fuente deiones Fe3+. Estos últimos de combinan con el ácido sulfhídrico el cual se reduce a sulfuro de hidrógeno y al reaccionar con una sal de hierro se transforma en sulfuro de hierro que se detecta por la formación de coloración negra en el tubo
Kligler Alcalino/alcalino. Se observa rojo en el taco (no fermenta glucosa) y rojo en el bisel (no fermenta lactosa. Es un aerobio estricto.Ejemplo Pseudomonas aeruginosa
Kligler Acido/alcalino: Se observa amarillo en el taco (fermenta la glucosa) y rojo en el bisel (no fermenta la lactosa. Es un anaerobio facultativo. Ejemplo: Salmonella typhi
Kligler Ácido/Acido: amarillo en el taco (fermenta glucosa) y amarillo en el bisel (fermenta lactosa) Es un anaerobio facultativo. Ejemplo: Escherichia coli
El caso de observar el fondo o taco de color rojoy el bisel amarillo no debe ocurrir puesto que indicaría fermentación de lactosa pero no de glucosa y al ser la lactosa un carbohidrato mas complejo que la glucosa una bacteria que lo fermente necesariamente debe fermentar la glucosa. De ocurrir sería un error de inoculación (no se pinchó el fondo del agar)
Formación de burbujas indica producción de gas
Ennegrecimiento indica producción dehidrógeno sulfurado.
CITRATO
El citrato de sodio es una sal del acido cítrico, un compuesto orgánico simple que constituye uno de los metabolitos del ciclo de los ácidos tricarboxilicos. Generalmente los microorganismos que emplean el citrato como única fuente de carbono, utilizan sales de amonio como única fuente de nitrógeno. El metabolismo del citrato realizado, por algunas bacterias se realizapor el ciclo de krebs y requiere el desdoblamiento del citrato por la enzima citritasa (citrato-oxalacetato-liasa o citrato desmolasa) en presencia de  magnesio o manganeso y de transportadores como citrato permeasas. 
La citritasa actúa sobre el citrato produciendo acido oxalacetico y acetato; productos que son convertidos enzimaticamente a piruvato y dióxido de carbono. Durante esta reacciónel medio comienza a alcalinizarse por el CO2 que se genera, el cual se combina con el agua y el sodio para formar Carbonato un producto alcalino, este carbonato da la alcalinidad que produce el cambio de color del indicador de pH del medio de verde a azul Prusia oscuro (indicador: azul de bromotimol, amarillo a pH< de 6.0 y azul a pH > de 7.6). El medio incluye citrato como única fuente decarbono y fosfato de amonio como única fuente de nitrógeno.



INTERPRETACION
El desarrollo de un color azul intenso  en 24-48 horas indica una prueba positiva y revela que el microorganismo en estudio ha sido capaz de utilizar el citrato en el medio con la formación de productos alcalinos. La prueba también es positiva en ausencia de color azul si existe crecimiento del microorganismo a lo largode la estría de inoculación.
LIA
FUNDAMENTO
Es un medio que sirve para demostrar la producción de dos enzimas: la lisina descarboxilasa y la lisina desaminasa, además la presencia de sales de hierro sirve para detectar la producción de H2S por algunos microorganismos.
 La descarboxilacion de la lisina ocurre en ambiente anaeróbico o sea en el fondo del tubo y se pone de manifiesto por la...