Pruebas Bioquimicas

Prueba

Carbohidratos I
Fermentación
de
carbohidratos

Medio de
Cultivo

Base de Rojo
Fenol y el
carbohidrato:
• Lactosa
• Sacarosa
• Dextrosa
• Manitol

Propósito

“Triple Sugar
Iron Agar”
(TSIA)Tratamiento
PostIncubación

“loop”
Determinar si la
bacteria puede
utilizar ese
carbohidrato en
específico.

*Tubo
Durham

Carbohidratos
II
Prueba de las
tres azúcares y
hierro

Inoculación eIncubación

Ninguno

24-48 hrs. / 37°C

1. Ver el patrón
de fermentación
de la bacteria.
2. Ver la
producción de
gases.
3. Observar la
producción de
H2S.

Primero estriado
con el “loop” y
luego una
estocadahasta el
fondo con la
aguja recta.

Proteínas,
Aminoácidos y
Enzimas

Rojo de Metilo
y VogesProskauer

Utilización de
Citrato

SIM
(SulfideIndoleMotility)

Caldo MRVP

Simmon’s
Citrate

1. Rojo deMetilo:
Determinar la
habilidad de las
bacterias para
producir y
mantener
sustancias
ácidas.
2. VogesProskauer:
Determinar la
capacidad de
transformar
sustancias
acídicas a no
acídicas.

Determinar si labacteria utiliza
citrato como
única fuente de
carbono.

Positivo
El medio se ve
amarillo =
producción de
ácidos a partir de
la fermentación =
utilización del
carbohidrato.
*Puede haber
producción degases
(acumulación de
gases en el tubo
Durham)
Utilización de
glucosa:

Ninguno

amarillo

Estocada hasta el
fondo con aguja
recta.
1. 2-3 gotas
del reactivo de
Kovac
37°C
24 hrs.:
Motilidad y H2S
48hrs.: Indol
“loop”

A las 48 horas,
se divide el
cultivo en dos:

37°C

1. Rojo de
metilo:
Incubadora
hasta los 7
días. Luego se
añaden 5 gotas
de rojo de
metilo.

2. VogesProskauer: 48
horas

2.VogesProskauer: se
añaden 10
gotas de αnaphtol y 5
gotas de KOH
40%. Esperar
30 min.

Estriado
con “loop”
Ninguno
24-48 hrs. / 37°C

El medio se ve
rojo (pH se
quedó igual o
aumentó). Se
producen
sustanciasalcalinas. La
bacteria utilizó
peptonas.
Utilización de
peptonas (no
fermenta azúcar)

amarillo
Utilización de
lactosa y/o
sacarosa
amarillo

1. Rojo de
metilo: 7 días

Negativo

rojo

24 hrs. /...