Pruebas Confirmatorias De Vih
PRUEBAS DE ELISA
Ensayo por inmunoabsorción ligado a enzimas
Es una técnica de inmunoensayo en la cual un antígeno inmovilizado se detecta mediante un anticuerpoenlazado a una enzima capaz de generar un producto detectable como cambio de color o algún otro tipo; en ocasiones, con el fin de reducir los costos del ensayo, nos encontramos con que existe unanticuerpo primario que reconoce al antígeno y que a su vez es reconocido por un anticuerpo secundario que lleva enlazado la enzima anteriormente mencionada. La aparición de colorantes permite medirindirectamente mediante espectrofotometría el antígeno en la muestra.
Durante los últimos años se han desarrollado técnicas mixtas que permiten detectar simultáneamente anticuerpos frente al VIH-1 y frenteal VIH-2, e incluso frente a otros retrovirus, y se utilizan rutinariamente en la mayoría de los centros de nuestro país. Más recientemente se han desarrollado técnicas duales que permiten ladetección simultánea de antígeno y de anticuerpos frente al VIH-1.
Las técnicas EIA, por lo general muy sensibles, detectan mínimas cantidades de anticuerpos por lo que pequeñas interferencias de substanciassimilares podrían conducir a un resultado positivo falso.
La probabilidad de un resultado falsamente positivo es mayor cuanto más baja es la prevalencia de la infección en la poblaciónestudiada. En contraposición y en la actualidad también son técnicas muy específicas, pero la práctica habitual de los centros que obtienen resultados positivos es utilizar al menos otra técnica ELISApara reafirmar la positividad, a ser posible con un diseño de reconocimiento de anticuerpos diferente; cuando la positividad se repite con un segundo EIA se confirman los resultados con otras técnicasde alta especificidad, usualmente con técnicas de inmunoblot o IFI. Además se suele solicitar siempre una segunda muestra del paciente para evitar posibles equivocaciones en la manipulación de los...
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