Pruebas Confirmatorias, Química De Orina
Páginas: 14 (3483 palabras)
Publicado: 19 de enero de 2013
PRUEBAS CONFIRMATORIAS, ORINA
INTRODUCCION
El examen general de orina es una prueba de gran importancia para el clínico y para el paciente mismo.
Debemos aplicar de todos nuestros conocimientos y emplear todos nuestros recursos dentro del laboratorio para proporcionar al médico y al paciente resultados de y con calidad.
El análisis de orina de rutina incluye pruebas químicas para pH,proteínas, glucosa, cetonas y sangre oculta. Algunos laboratorios también incluyen pruebas para bilirrubina, urobilinógeno y nitritos según tipo de tira reactiva que se utilice.
Siempre es recomendable que se incluya una prueba selectiva para sustancias reductoras en exámenes de orina de niños.
A continuación consideraremos las pruebas alternativas y confirmatorias, que debido a su importanciaes preciso confirmar o descartar por un método más específico, además de la tira reactiva.
Estos procedimientos pueden ser mediciones cualitativas o semicuantitativas.
PRUEBAS CONFIRMATORIAS DE ORINA
PROTEINAS:
* Ácido Sulfosalicílico: es el ácido de prueba que se utiliza con mayor frecuencia porque no requiere necesariamente el uso del calor. Se han utilizado distintasconcentraciones y proporciones de este ácido y cada una de ellas da diferentes escalas de resultados.
* Reactivo de Exton: se comprobó que agregando sulfato de sodio al ácido sulfosalicílico se logra la formación de un precipitado más uniforme.
Para preparar el reactivo de Exton se debe disolver 88g de sulfato de sodio en 600ml de agua destilada con la ayuda del calor. Se deja enfriar. Luego se leagrega 50g de ácido sulfosalicílico y se diluye a 1000 ml.
Procedimiento de la prueba:
1. Centrifugar una alícuota de orina y luego utilizar el sobrenadante.
2. Mezclar volúmenes iguales del líquido sobrante y el reactivo de Exton.
3. Graduar la turbidez de la siguiente manera.
a. Negativo: no existe turbidez
b. Trazas: se percibe turbidez solo contra un fondo negroc. 1+: se observa turbidez, pero no es granular
d. 2+: se observa turbidez y es granular.
e. 3+: turbidez considerable y existe aglutinación.
f. 4+: la nube es densa con masas aglutinadas de gran tamaño que pueden solidificarse.
Resultados positivos falsos: estos pueden producirse en el tratamiento con tolbutamida, en dosis masivas de penicilina, con sulfamidas y hastadurante tres días después de la administración de sustancias que contraste radiólogo.
Resultados negativos falsos: orinas muy alcalinas pueden dar reacciones negativas falsas, también pueden ocurrir negativos falsos con muestras muy diluidas.
* Prueba con calor y Acido Acético: las proteínas son más susceptibles a los agentes precipitantes cuando se encuentran en el pH de su puntoisoeléctrico, que por lo general es bajo. El método que se describe a continuación utiliza este principio, así como el hecho de que el calor torna las proteínas insolubles provocando su coagulación.
Procedimiento:
1. Centrifugar o filtrar unos diez ml de orina y decantar el sobrenadante en un tubo pyrex. El tubo debe estar lleno en sus dos terceras partes.
2. Sostener la parte inferior del tubocon un soporte y hacer bullir la parte superior del tubo durante unos dos minutos (el tubo debe ser sostenido formando un ángulo sobre la llama y apuntando en dirección opuesta al cuerpo). Si aparece turbidez, puede deberse a la presencia de proteínas, fosfatos o carbonatos.
3. Agregar de 3-5 gotas de ácido Acético al 5 o 10% y colocar nuevamente la porción de superior del tubo sobre lallama. El ácido disolverá los fosfatos o carbonatos que puedan ser la causa de la turbidez, también disminuirá el pH, llevándolo más próximo al punto isoeléctrico de las proteínas; en consecuencia, la turbidez puede tornarse más intensa tras el agregado del ácido al aumentar la precipitación proteica.
4. Leer el grado de turbidez de la porción superior del tubo e informar de acuerdo con la...
INTRODUCCION
El examen general de orina es una prueba de gran importancia para el clínico y para el paciente mismo.
Debemos aplicar de todos nuestros conocimientos y emplear todos nuestros recursos dentro del laboratorio para proporcionar al médico y al paciente resultados de y con calidad.
El análisis de orina de rutina incluye pruebas químicas para pH,proteínas, glucosa, cetonas y sangre oculta. Algunos laboratorios también incluyen pruebas para bilirrubina, urobilinógeno y nitritos según tipo de tira reactiva que se utilice.
Siempre es recomendable que se incluya una prueba selectiva para sustancias reductoras en exámenes de orina de niños.
A continuación consideraremos las pruebas alternativas y confirmatorias, que debido a su importanciaes preciso confirmar o descartar por un método más específico, además de la tira reactiva.
Estos procedimientos pueden ser mediciones cualitativas o semicuantitativas.
PRUEBAS CONFIRMATORIAS DE ORINA
PROTEINAS:
* Ácido Sulfosalicílico: es el ácido de prueba que se utiliza con mayor frecuencia porque no requiere necesariamente el uso del calor. Se han utilizado distintasconcentraciones y proporciones de este ácido y cada una de ellas da diferentes escalas de resultados.
* Reactivo de Exton: se comprobó que agregando sulfato de sodio al ácido sulfosalicílico se logra la formación de un precipitado más uniforme.
Para preparar el reactivo de Exton se debe disolver 88g de sulfato de sodio en 600ml de agua destilada con la ayuda del calor. Se deja enfriar. Luego se leagrega 50g de ácido sulfosalicílico y se diluye a 1000 ml.
Procedimiento de la prueba:
1. Centrifugar una alícuota de orina y luego utilizar el sobrenadante.
2. Mezclar volúmenes iguales del líquido sobrante y el reactivo de Exton.
3. Graduar la turbidez de la siguiente manera.
a. Negativo: no existe turbidez
b. Trazas: se percibe turbidez solo contra un fondo negroc. 1+: se observa turbidez, pero no es granular
d. 2+: se observa turbidez y es granular.
e. 3+: turbidez considerable y existe aglutinación.
f. 4+: la nube es densa con masas aglutinadas de gran tamaño que pueden solidificarse.
Resultados positivos falsos: estos pueden producirse en el tratamiento con tolbutamida, en dosis masivas de penicilina, con sulfamidas y hastadurante tres días después de la administración de sustancias que contraste radiólogo.
Resultados negativos falsos: orinas muy alcalinas pueden dar reacciones negativas falsas, también pueden ocurrir negativos falsos con muestras muy diluidas.
* Prueba con calor y Acido Acético: las proteínas son más susceptibles a los agentes precipitantes cuando se encuentran en el pH de su puntoisoeléctrico, que por lo general es bajo. El método que se describe a continuación utiliza este principio, así como el hecho de que el calor torna las proteínas insolubles provocando su coagulación.
Procedimiento:
1. Centrifugar o filtrar unos diez ml de orina y decantar el sobrenadante en un tubo pyrex. El tubo debe estar lleno en sus dos terceras partes.
2. Sostener la parte inferior del tubocon un soporte y hacer bullir la parte superior del tubo durante unos dos minutos (el tubo debe ser sostenido formando un ángulo sobre la llama y apuntando en dirección opuesta al cuerpo). Si aparece turbidez, puede deberse a la presencia de proteínas, fosfatos o carbonatos.
3. Agregar de 3-5 gotas de ácido Acético al 5 o 10% y colocar nuevamente la porción de superior del tubo sobre lallama. El ácido disolverá los fosfatos o carbonatos que puedan ser la causa de la turbidez, también disminuirá el pH, llevándolo más próximo al punto isoeléctrico de las proteínas; en consecuencia, la turbidez puede tornarse más intensa tras el agregado del ácido al aumentar la precipitación proteica.
4. Leer el grado de turbidez de la porción superior del tubo e informar de acuerdo con la...
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