Pruebas cualitativas para la identificacion de lipidos

EXPERIMENTO 10

PRUEBAS CUALITATIVAS PARA LA IDENTIFICACIÓN DE LÍPIDOS

REQUISITOS Repasar las estructuras de los lípidos y sus reacciones. 1. FUNDAMENTOS

OBJETIVOS Poner de manifiesto ciertas propiedades de los lípidos, algunas de las cuales pueden servirnos para su identificación

Los lípidos, son un grupo heterogéneo de compuestos, de naturaleza antipática, es decir que contienenregiones hidrofóbicas y regiones hidrofílicas (figura 1). La mayor parte de los lípidos abundantes en la naturaleza (triacilgliceroles), están formados por ácidos grasos de cadenas hidrocarbonadas pares, saturados o insaturados (en CIS, figura 2). Los lípidos llevan a cabo múltiples funciones en el organismo, como: almacenamiento de energía, de transporte, cumplir funciones hormonales, actuar comovitaminas, formar parte de las membranas celulares confiriéndoles la propiedad de permeabilidad selectiva, al permitir el paso o no de algunas sustancias y en determinada dirección, así como la conducción nerviosa y el transporte activo como la bomba de Na+/K+. A diferencia de los carbohidratos, proteínas y ácidos nucleicos, no forman polímeros, son mas bien moléculas pequeñas que presentan unafuerte tendencia a asociarse mediante fuerzas no covalentes. Algunas de las propiedades de los lípidos pueden ser usadas para su reconocimiento, ya que pueden reaccionar con una variedad de agentes originándose productos coloreados, desprendimiento de vapores, formación de jabones (figura 3), entre otros. Figura 1 Cabeza-Cola de los ácidos grasos

CH3 COLA

O C OH CABEZA

HO C O CABEZA COLACH3

122

Figura 2 ionización CH3

Isomería CIS-TRANS de los ácidos grasos, puentes de hidrógeno con el agua y su

COOH CIS

CH3 TRANS H O H O

COOH

CH3 TRANS

C

OH H O H

R-COOH
HC HC

R-COO

+ H+

Ácido Oleico CIS (p.f. 13o -16o) COOH

H 3C

CH HC

Ácido Elaídico TRANS (p.f. 44o) COOH

Figura 3
3HC

Saponificación de un ácido graso

COOH NaOH

ÁcidoPalmítico

Cabeza Polar
3HC

COONa Cola Apolar

Palmitato de sodio (Jabón)

123

1.1

Fundamentos químicos de las pruebas para lípidos.

1.1.1 Prueba de acroleína La positividad de esta reacción indica la presencia de glicerina y se manifiesta por el desprendimiento de vapores blancos irritantes de olor desagradable, cuya reacción se muestra en la siguiente figura. Figura 4Reacción de la prueba de la acroleína
CH2OH CHOH CH2OH GLICERINA SO4HK, ∆
2

CH2 CH C O H ACROLEINA

H2 O

1.1.2 Prueba de fusión (para investigar fósforo) La positividad de esta reacción indica la presencia de fósforo inorgánico. Las sustancias orgánicas dan la reacción positiva, siempre que se haga una hidrólisis previa. La reacción positiva se manifiesta por la reacción de un precipitadoamarillo de fosfomolibdato de amonio. (Figura 5) Figura 5 Reacción de la prueba de fusión pH ácido (P) (NH4)3 [ p ( Mo3 O10 ) 4 ] (Fosfomolibdato de amonio)

(NH4)6Mo7O24. 4H2O (Molibdato de amonio) 1.1.3 Prueba de Iodo:

La positividad de esta reacción indica la presencia de ácidos grasos de la serie etilénica. La reacción positiva se manifiesta por la desaparición del color del Yodo, debido aque enlaza en el doble enlace (figura 6) Figura 6 Reacción de la prueba de Iodo I2 I I | | CH3-(CH2)7-CH-CH-(CH2)7-COOH (Di-iodo-9,10-ác.esteárico)

CH3-(CH2)7-CH=CH-(CH2)7-COOH (ácido oleico) 1.1.4 Prueba de Lieberman

Se basa en la reacción coloreada (verde) que dan aquellas sustancias que tienen como núcleo el ciclo pentanoperhidrofenantreno. 124

1.1.5

Prueba de saponificación

Esuna prueba para identificar ácidos grasos, por lo tanto, general para los lípidos que los contengan. Los jabones se define químicamente como, las sales metálicas de los ácidos grasos superiores. La figura 7 muestra la formación de un jabón Figura 7 Prueba de saponificación CH2OH | CH.OH | CH2OH Glicerol +

CH2-OOC-(CH2)14-CH3 | CH-OOC-(CH2)14-CH3 | CH2-OOC-(CH2)14-CH3 Tripalmitoil-glicerol...