pruebas de laboratorio

PRÁCTICA No. 6 “cuantificación de hemoglobina”
RICARDO JIMENEZ
Sangre, tubos de ensayo, hemoglobina


Introducción:
La hemoglobina es el componente más importante de los glóbulos rojos yestá compuesto de una proteína llamada hemo, que fija el oxígeno, para ser intercambiado en los pulmones por dióxido de carbono
La hemoglobina es una proteína que tiene la función de transportar eloxígeno de los pulmones a los tejidos, se encuentra en los glóbulos rojos (células de la sangre), y se caracteriza por estar formada de hierro.
Fundamento:
Se diluye la sangre en una solución deferrocianuro potásico y cianuro potásico. El ferrocianuro potásico oxida la Hb a Hi. Y el cianuro potásico proporciona los iones cianuro para formar HicN que tiene una absorbancia máxima amplia a una longitudde onda de 540 mm. La capacidad de absorbancia de la solución se mide espectrofotométricamente y se compara con la solución estándar de HicN
Metodología.
Hacer una serie de tres tubos con elestándar de hemoglobina para calcular el factor de calibración. Colocar al primer tubo 5 mL de estándar puro, al segundo tubo 2.5 mL, al tercer tubo 1 ml. Llevar al volumen de 5 mL con cianametahemoglobinael segundo y tercer tubo. Mezclar y dejar reposar 10 minutos.
Leerlos en espectrofotómetro a 540 nm y anotar la densidad óptica de los tubos, Obtener la concentración de cada tubo en gramos pordecilitros, Dividir la concentración de cada tubo entre la densidad óptica, Sumar los 3 factores y sacar un promedio, Medir 5 mL solución de cianametahemoglobina en un tubo de 13x100 mm, Con pipetaautomática colocar 20 microlitos de sangre, Mezclar bien y dejar reposar por 10 minutos,Transferir a la cubeta de lectura y leer en el espectrofotómetro a 5
Cálculos:
(Absorbancia) (.38)
Hb(gr/d)Lmuestrade prueba A540mm/estandar a 540nm x concentracion del estandar(mg/dL)/100mg/dL x 251
Interpretación clínica:
Valores altos: Cardiopatía congénita, Eritrocitosis, Niveles bajos de oxígeno en la...