Pruebas Inmunoenzimaticas

Dentro de los procedimientos inmunológicos, los más útiles y prácticos son los que se basan en la especificidad de la unión antígeno-anticuerpo. La propiedad que tienen las inmunoglobulinas de unirsea un antígeno, la especificidad de esta unión y el hecho de que pueda ser visualizable por fenómenos de precipitación, aglutinación y otros mecanismos indirectos (marcaje con fluoresceína, conradiosótopos o con enzimas) hace que éstos métodos se utilicen de forma muy amplia. Aunque el principio es idéntico en todas las técnicas (unión antígeno-anticuerpo) hoy en día se emplean diversos métodos,basados cada uno de ellos en un procedimiento distinto para visualizar la unión: • Técnicas de precipitación. Cuando la reacción Ag-Ac se realiza en determinadas condiciones, el complejo formado seinestabiliza y precipita, de tal forma que el precipitado formado es fácilmente detectable y cuantificable. • Técnicas de aglutinación. Cuando el antígeno se encuentra unido o formando parte de células,bacterias o partículas, la reacción Ag-Ac puede ser detectada por el aglutinado celular o bacteriano formado, que es fácilmente visualizable. • Técnicas de fluorescencia. El anticuerpo se marca confluoresceína, con lo que se puede conocer la unión Ag-Ac a través del seguimiento de la fluorescencia emitida por el mismo. • Técnicas de citometría. La señal producida por la excitación del fluorocromopermite conocer el porcentaje de células que es reconocido por el anticuerpo monoclonal empleado. • Técnicas de radioinmunoensayo. Se une al anticuerpo un isótopo radiactivo, siendo posible lacuantificación del complejo Ag-Ac a través de la radiactividad emitida. • Técnicas de enzimoinmunoensayo. El anticuerpo se une a una enzima, con lo que es posible la cuantificación del complejo Ag-Ac através de la acción que dicha enzima ejerce sobre un substrato cuyos cambios son fácilmente cuantificables. • Técnicas de nefelometría. Se basa en la medida de los efectos producidos por los complejos...