Pruebas Inmunológicas

PRUEBAS INMUNOLÓGICAS (Prueba de Pregnosticón)

Se basan en que la hCG, por ser una proteína, posee alta capacidad antigénica; es decir, produce anticuerpos; pueden ser con o sin isótopos radiactivos.
Por inmunización de un animal se obtiene antisuero con anticuerpos antihCG, que al mezclarlo con orina de mujer preñada (hCG) origina una reacción antígeno-anticuerpo que puede ser visible pordiferentes métodos. Muchos ensayos inmunológicos se han descrito e incluyen: inhibición de la hemaglutinación, descrito por Wide y Gemzell en 1960 (29), la de fijación del complemento de Brody y Carlström en 1960 (30), la de precipitación del gel, introducida por McKean en el año 1960 (31) y la de la inhibición de la aglutinación del látex de Little, en 1962, entre otras (32). Se pienza que laprimera en aparecer fue la introducida en 1960 por Wide y Gemzell (29); pero existen comunicaciones en las cuales, el uso de inhibición de la aglutinación para detectar gonadotropinas fue reportada por vez primera por Strausser en 1958 que utilizó el tratamiento de los eritrocitos con formalina y ácido tánico y la del revestimiento con hCG (33,34). Esta prueba no utiliza isótopos, el antisuero esobtenido de conejo inmunizado con hCG y se basa en que al poner en contacto los “cadáveres de eritrocitos”, impregnados de coriogonadotropina, con un antisuero de esta hormona, presentaban una reacción denominada hemoaglutinación. Esta expresión (hemoaglutinación), no es muy correcta, se refiere a que estos eritrocitos no se coagulan de un modo visible, como ocurre en la determinación de gruposanguíneo. La prueba de que han reaccionado con los anticuerpos, se manifiesta en una modificación de su comportamiento en solución acuosa. Precipitan de una forma que dan la impresión de estar ligados entre sí por una red, la cual los obliga a depositarse en el fondo del tubo, formando una especie de tapiz. Los glóbulos rojos que no han reaccionado con los anticuerpos y por supuesto, no están aglutinados,se depositan a lo largo de las paredes del tubo y si éste tiene un fondo semiesférico, se forma un anillo apreciable a simple vista. Si existe embarazo, en el cual hay mucha hCG, la mayoría de los anticuerpos es captada por este exceso de hormona y se impide la “hemoaglutinación”. En el fondo del tubo se forma un anillo y la reacción es positiva.
Procedimiento:

La prueba de aglutinación dellátex se refiere a una en la cual los hematíes cubiertos de hCG son sustituidos por partículas de látex, revestidas o unidas en forma covalente de hCG. Los equipos comerciales contienen dos reactivos. Uno de ellos es una suspensión de partículas de látex, revestidas o cubiertas con la hCG y el otro una solución de anticuerpos contra hCG.
Para probar la hCG se mezcla una gota de orina con una de lasolución que contienen los anticuerpos en un portaobjeto de vidrio negro. Si no hay hCG en la muestra de prueba, los anticuerpos quedan disponibles para aglutinar las partículas de látex, que se agregan posteriormente. La aglutinación se observa mucho mejor cuando se ilumina con luz brillante contra el fondo obscuro del portaobjeto de vidrio. Si hay hCG en la orina, se unirá a los anticuerpos yde este modo impedirá la aglutinación inducida por los anticuerpos de las partículas de látex revestidas con hCG; por lo tanto la prueba será positiva si no hay la aglutinación y negativa en caso contrario; o sea, presencia de aglutinación (37). Es decir, un antisuero hCG mezclado con orina problema,
no produce aglutinación de las partículas de látex y se deduce que hay hCG en la orina y lapruebas es positiva de embarazo. Esta prueba es precisa y se realiza en 3 minutos; pero tiene limitaciones en cuanto a su precocidad y sensibilidad, la cual es variable, 250- 1 400 mUI/mL (38,39).

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