Pruebas inmunologicas

NOMBRE DE LA PRÁCTICA: Determinación de Factor Reumatoide
COMPETENCIA: Realiza la determinación del Factor Reumatoide, como una prueba más para la detección de infecciones reumáticas, como la artritis reumatoide.
MATERIAL:
Un equipo de Reumaclin de sanofi o similar que contiene los siguientes reactivos:
REACTIVOS:
1 Reactivo de látex sensibilizado (almacenar a Temp. De +2 a +8º C)
2 Frascoscon 60 ml de solución amortiguadora
1 Frasco con suero control positivo
1 Frasco con reactivo control negativo
Laminillas con 3 áreas marcadas, con fondo negro para realizar la prueba.
Aplicadores de madera
Jeringa, torundas con alcohol y torniquete
Tubo rojo o con gel para la toma de sangre.
Rotor
Reloj o cronómetro
INTRODUCCIÓN
FACTOR REUMATOIDE
Definición: Inmunoglobulina presenteen el suero del 50-95 por ciento de los adultos que tienen artritis reumatoide y que sirve para diagnosticar e investigar la enfermedad.
El factor reumatoide (FR) es una prueba que mide la presencia y nivel de la IgM específica contra las inmunoglobulinas IgG anormales, producidas por los linfocitos de la membrana sinovial, de las articulaciones de personas afectadas por la artritis reumatoide.La artritis reumatoide es una enfermedad crónica, que produce la inflamación de las articulaciones principalmente de manos y pies.
Cuando se originan estas inmunoglobulinas IgG y se fija la IgM, se forman Inmunocomplejos IgG-IgM que activan el complemento y otros factores inflamatorios que producen secundariamente la destrucción de las articulaciones afectadas. Por ello se le llama una enfermedadautoinmune, ya que es el sistema inmunitario del individuo el que destruye tejidos del propio cuerpo.
Varias pruebas para ponerlos en evidencia se basan en provocar la reacción antígeno-anticuerpo, de modo que el suero del enfermo aglutine partículas –27 hematíes, látex, bentonita, etc. A las que se ha fijado una capa de globulina gamma
No es un análisis específico de esta enfermedad, aparecepositivo en el 80% de los pacientes con artritis reumatoide, pero puede aparecer negativo. Inclusive puede aparecer positivo en otras enfermedades no relacionadas (Lupus
Eritematoso Sistémico, Leucemia, Síndrome Nefrótico etc.) En personas de la tercera edad pueden aparecer niveles elevados sin repercusión clínica.
DESARROLLO
METODO CUALITATIVO EN PLACA
1. Dejar que los reactivos y muestrasalcancen la temperatura ambiente.
2. Preparar una dilución 1:20 del suero problema; diluyendo 0.1 ml del suero con 1.9 ml de solución amortiguadora.
3. Poner 1 gota (aproximada mente 0.05 ml) del suero diluido en las áreas marcadas en la laminilla
4. Colocar una gota del suero control (+) y (-) en las áreas marcadas del la laminilla.
5. Mezclar el reactivo de látex Reumaclin hasta obtener unasuspensión homogénea y añadir 1 gota de reactivo de látex a cada uno de los sueros controles.
6. Mezclar con aplicadores diferentes por cada área
7. Mover en un ángulo de 45º la laminilla por 2 minutos
8. Observar inmediatamente la aglutinación utilizando una fuente de luz directa, comparar las reacciones del suero y de los controles.
INTERPRETACION
La aglutinación de las partículas de látexindica una reacción positiva (+). Si es, así, realizar la prueba cuantitativa.
La no aglutinación o una ligera aparición de granulosidad que no exceda a la observada en el control (-), indica un resultado (-).
Nota: la sensibilidad del reactivo de látex es 3UI/ml.
NOMBRE DE LA PRÁCTICA: Proteína C reactiva
COMPETENCIA: Determina y cuantifica la proteína C reactiva en suero sanguíneo humano quecursa con un proceso inflamatorio o necrótico.
REACTIVOS: Un equipo para PCR que contiene los siguientes reactivos:
un Látex anti proteína C reactiva (conservar entre 2 y 8 ºC) un Suero control positivo
Un Suero control negativo
MATERIAL:
 Laminillas con 3 áreas marcadas, con fondo negro para realizar la prueba.
 Aplicadores de madera
 Jeringa, torundas con alcohol y torniquete
 Tubo...