Pruebas para el diagnostico inmunologico de la infeccion

PRUEBAS PARA EL DIAGNOSTICO DE LA INFECCION
Son muy numerosas. Relacionamos en la tabla 1 las que tradicionalmente han sido más empleadas y describiremos someramente el fundamento de algunas de ellas.
MARCADORES DE ACTIVIDAD DEL PARASITO
Visualización del parásito. Detección directa. Antígenos. DNA.
* Inoculación animal.
*Tinción
* Cultivo.
* Detección de antígenos.
* PC
MARCADORESSEROLOGICOS
* Sabin Feldman.
* Inmunofluorescencia indirecta.
* Fijación de Complemento.
* Hemaglutinación indirecta.
* Aglutinación directa.
* Latex.
* ISAGA (Inmunoadsorción hemaglutinación)
* ELISA IgG e IgM.Avidez de anticuerpos

Técnicas para detectar el parásito, sus antígenos o su DNA
La ventaja de éste grupo de técnicas es que si son positivas nos permite hacer el diagnóstico deinfección aguda con gran seguridad. Esto compensa en gran manera las dos desventajas más importantes que tienen estos procedimientos: la obtención de la muestra y la tediosidad de su preparación previa.
Visualización: Este método se sigue empleando para estudios en L.C.R. o Líquido amniótico. La muestra se centrifuga a 3.000 rpm y el sedimento es observado con 400 aumentos (10x40). Solo la visión dealgunos taquizoitos confirmará el diagnóstico. La Inoculación en ratón (Cepa NURI) es un método que puede emplearse con cualquier tipo de muestra. Después de preparada se inyecta en la cavidad peritoneal. Se vigila el líquido peritoneal semanalmmente durante cuatro o seis semanas en busca del parásito. Si para entonces no aparecen se sacrifica el animal y se realiza la detección de anticuerpos ensuero (un título > de 1/1000 es indicativo de la infección del ratón) y la búsqueda de Toxoplasmas en L.C.R. y otros tejidos. Se puede realizar un subcultivo. El Cultivo se ha visto facilitado por la aparición de los laboratorios de virología. Para esta técnica se emplean habitualmente fibroblastos. La sensibilidad de esta prueba es comparable a la inoculación en un animal, con la ventaja de queen 3-6 días puede verse ya el parásito. La Tinción resulta especialmente útil con los los métodos inmunohistoquímicos que permiten poner de manifiesto de forma rápida y específica los quistes tisulares. Otras tinciones frecuentes han sido las de Giemsa, PAS y hematoxilina-eosina. Hoy no se emplean para investigar Toxoplasma. Otra posibilidad de diagnóstico se encuentra la Detección de antígenoscirculantes. Los antígenos aparecen en sangre de forma intermitente y tras la rotura del parásito. La detección puede realizarse con diferentes metodologías aunque las más empleadas son las de fundamento enzimático. Su positividad suele coincidir con el incremento de IgG específica y su desaparición suele preceder al aclaramiento de la IgM. Aún no están homologadas. PCR permite un diagnóstico muyseguro. Existen numerosas publicaciones en las que se demuestra su utilidad en el diagnóstico de cualquiera de las formas de toxoplasmosis. Puede realizarse con muestras de orina, líquido cefalorraquideo , amniótico, sangre circulante y coágulo. La zona a amplificar ha variado en los últimos años siendo B1 la zona diana de consenso. Existen numerosas publicaciones en las que se demuestra su utilidaden el diagnóstico de los pacientes con SIDA, inmunosuprimidos, gestantes y neonatos.
Técnicas para detectar anticuerpos
La demostración de la existencia de diferentes clases de anticuerpos específicos para los diversos antígenos del Toxoplasma y en diferentes estadios de la infección ha impulsado al desarrollo de muchas y variadas pruebas de diagnóstico serológico. Todas ellas se emplean con unobjetivo: Poder asegurar la infección y fijar en el tiempo el momento de la primoinfección o diagnosticar con seguridad una reactivación o una infección Se piensa que durante la fase inicial de la infección los anticuerpos IgG, IgM,IgA están dirigidos contra los antígenos mayores de la membrana y que la liberación de antígenos citoplásmicos solo produce estímulo de las IgG.
Al emplear...