Práctica Colesterol en Suero

PRÁCTICA NO. 4
Determinación De Colesterol En Suero
Autor: Estefy Valeria Viveros Villalba

INTRODUCCIÓN
El colesterol es una sustancia cerosa, de tipo grasosa, que existe naturalmente entodas las partes del cuerpo. Está compuesto por 4 anillos de carbono y una cadena lineal.
El cuerpo necesita determinada cantidad de colesterol para funcionar adecuadamente. Pero el exceso decolesterol en la sangre, combinado con otras sustancias, puede adherirse a las paredes de las arterias. Esto se denomina placa. Las placas pueden estrechar las arterias o incluso obstruirlas.
El colesterolpuede provenir de dos vías la vía exógena (Dieta) y la vía Endógena (producido por el hígado).




Las Lipoproteínas son las encargadas de transportar el colesterol entre otros. Los LDL entreotras lipoproteínas están principalmente encargados de transportar colesterol del hígado al organismo. Mientras que los HDL transportan el colesterol del organismo al hígado.

FUNDAMENTO
Ladeterminación de colesterol total está basada en el procedimiento enzimático descrito por Allain, donde la colesterol-esterasa (CE) hidroliza los esteres de colesterol a colesterol libre y ácidos grasos. Enpresencia de oxígeno, el colesterol libre es oxidado por el colesterol Oxidasa (CO) a cholest-4-en-3-one y peróxido de hidrogeno. Cuando el fenol esta oxidativamente acoplado con 4-aminoantipirina en lapresencia de peroxidasa (HPO), y peróxido de hidrogeno se produce un cromóforo de quinoneimina. La intensidad de color producido es proporcional a la concentración de colesterol y se midecolorimétricamente a 500nm
MATERIAL
Tubos de ensayo
Puntillas para pipeta automática
Gradilla
Guantes
Bata




EQUIPO
Espectrofotómetro
REACTIVOS
Colesterol enzimático
Estándar de colesterolTÉCNICA
1. Pipetee en las cubetas los siguientes volúmenes(ml) y mezcle bien

Reactivo
Estándar
Muestra
Reactivo
2 ml
2ml
20µl
Estándar

20µl

Muestra


20µl

2. Incubar todos...