pseudomonas


Capítulo 5




Caracterización Microbiológica.


5.1 Microorganismo y medios de cultivo utilizados.


5.1.1. Cepa Bacteriana.


Entre las bacterias capaces de formar biofilms se encuentran tanto las Gram positivas como Gram negativas, patógenas y no patógenas. Entre las bacterias Gram negativas los biofilms de Pseudomonas tienen especial importancia ya que por suubicuidad impactan en la medicina, industria y medio ambiente.

Las Pseudomonas son microorganismos móviles, debido a la presencia de uno o más flagelos polares. Estos microorganismos presentan además, un interés particular debido a que son tomados como modelo en estudios de desplazamiento colectivo conocido como swarming (2-13), tal como se detallará en los Capítulos 7 y 8. Algunas especiessintetizan una capa de exopolisacáridos que facilita la adhesión celular, la formación de biopelículas o biofilms, y protege de la fagocitosis, de los anticuerpos o complementos, aumentando así su patogenicidad. Se encuentran normalmente en el suelo, aunque también pueden ser patógenos oportunistas en animales (P. aeruginosa, P. fluorescens) y patógenos de plantas (P. syringae). Tienen un metabolismoaerobio, con el O2 como aceptor de
electrones pero algunas cepas tienen uno anaerobio, utilizando el NO3- como aceptor de

electrones. Algunas bacterias de este grupo producen pigmentos fluorescentes de colores amarillo-verdosos, fácilmente solubles en agua (14). Estos pigmentos actúan como sideróforos: moléculas cuya función es capturar el hierro del medio necesario para el metabolismo delmicroorganismo. Presentan una amplia versatilidad metabólica que se traduce en su capacidad para utilizar sustratos muy variados como fuente de carbono. Dicha versatilidad se debe a la presencia de un gran número de plásmidos que contienen operones inducibles para la síntesis de enzimas específicas las cuales permiten catabolizar los compuestos presentes en el medio. Debido a ello, las Pseudomonas soncapaces de colonizar un amplio rango de nichos (15). En concordancia con otros biofilms bacterianos, las biopelículas de Pseudomonas son más resistentes a los antibióticos que las correspondientes células planctónicas (16).
Para el presente trabajo de Tesis, se eligió una cepa de P. fluorescens que fue cedida gentilmente por la Dra Christine Gaylarde del Departamento de Biología y Química de laUNIJUI en Brasil y fue identificada por pruebas estándares bacteriológicas utilizando medios selectivos y tests bioquímicos.
Las bacterias P. fluorescens son organismos aerobios quimioorganotróficos, es decir, que su metabolismo se basa en reacciones de óxido-reducción para obtener energía, utilizando sustancias oxidables a pH neutro o básico. Su diámetro varía entre 0,5 y 0,8 µm. Se reproducen atemperaturas mesófilas (entre 25 y 30°C) y como todo el género de Pseudomonas presentan una gran capacidad para utilizar diversidad de nutrientes, lo que explica su ubicuidad. Su versatilidad nutricional ligada a su dotación enzimática, hace de estas bacterias un grupo importante ecológicamente, dado que son probablemente


responsables de la degradación aeróbica de muchos compuestosen los diferentes ecosistemas.
P. fluorescens ha sido frecuentemente identificada como microorganismo contaminante de la piel humana y como agente causante de bacteremia (presencia de bacterias en sangre) e infecciones en pacientes hospitalizados (17-19). Esta especie de Pseudomonas también ha sido aislada de pacientes que presentaban infecciones complicadas del tracto urinario (11, 20).Asimismo cabe mencionar su presencia en biofilms desarrollados en diversos sistemas industriales, como así también su potencial riesgo para causar serios problemas en términos del proceso y la seguridad del producto final en la industria alimenticia. En los procesos industriales de alimentos perecederos diarios, P. fluorescens es uno de los microorganismos psicotróficos más comúnmente...