punto de muerte termica
Esterilización con el calor
Calor Seco: Como su nombre lo indica se transmite a través de un fluido seco caliente (aire). Presenta la desventaja, con respecto al calor húmedo, de que es poco penetrante. El aire húmedo es un conductor máseficiente del calor que el aire seco ya que el coeficiente de transmisión del calor del agua es mayor que el del aire (Kagua>Kaire). La muerte de microorganismos en este caso se produce por deshidratación y por lo tanto hay que llegar a temperaturas elevadas (160 °C) durante tiempos altos (1 hora o más). En el laboratorio se utiliza el calor seco pare esterilizar material de vidrio y no paramedios de cultivo, pues las altas temperaturas usadas, pueden alterar la estructura (y la disponibilidad) de nutrientes tales como proteínas, hidratos de carbono, etc. En el caso del calentamiento directo por llama, también llamado “flameado”, se utiliza especialmente para esterilizar agujas, ansas y otros elementos que no se deterioran con el tratamiento. Generalmente esta metodología es empleadapara “repicar” células de un medio a otro.
Calor Húmedo: Este tipo de calor es más conveniente porque el vapor de agua difunde por ósmosis a través de la membrana de los microorganismos, produciendo la muerte de los mismos por coagulación de su protoplasma y no por deshidratación, como en el caso del calor seco. Los diferentes métodos utilizados son:
EBULLICIÓN: se realiza a 100 °C, a estatemperatura se destruyen todas las células vegetativas, esporos de hongos y levaduras, y la mayor parte de las esporas bacterianas. Por lo tanto, cuando solo es necesario conseguir una esterilización “relativa”, puede recurrirse a este método. En el caso que deban esterilizarse líquidos, estos se llevan directamente a ebullición por tiempos variables, que dependen de diversos factores aconsiderar. En caso de sólidos contenidos en recipientes, el material se sumerge en agua hirviente por tiempos variables.
VAPOR FLUENTE: consiste en un tratamiento con vapor de agua a presión atmosférica (o sea vapor saturado a 100 °C). Esta es una técnica útil para tratar sustancias que no admiten calentamientos superiores a 100 °C sin perder alguna de sus propiedades. Los equipos usados son sencillosy están constituidos por recipientes con falso fondo perforado, sobre el cuál se acomoda el material a esterilizar. Este tratamiento se puede realizar también en el autoclave, trabajando con la espita abierta. El tiempo de calentamiento depende del material a tratar y su grado de contaminación.
VAPOR A PRESIÓN: normalmente se realiza en el laboratorio la esterilización de medios de cultivoen un equipo denominado autoclave. Las condiciones de tiempo y temperatura dependen de la naturaleza del medio. Cabe destacar que a menudo la esterilización presenta dos aspectos a veces incompatibles, se quiere por un lado destruir todos los microorganismos presentes y por el otro evitar la alteración de los nutrientes. En realidad, el calor puede provocar la desnaturalización de vitaminas yotros factores de desarrollo, la separación de azufre coloidal (Cisterna, por ejemplo), caramelizacion de azúcares, etc. Por lo tanto se deben considerar para cada caso en particular las variables de la esterilización (esto es temperatura y tiempo).
En forma general se puede decir que a pH entre 4 y 5 es suficiente esterilizar durante 15 a 30 minutos a vapor fluente; a un pH de 5 a 6,5 latemperatura asciende a 119 °C y a pH 6,5 a 7,5 se necesita una temperatura de 125 °C, todos durante el mismo tiempo.
Fase de muerte térmica
La fase de muerte también sigue una cinética exponencial y puede ser sometida a un tratamiento matemático similar al usado para el tratamiento matemático del crecimiento. Si representamos la variación del logaritmo del número de células supervivientes a un...
Regístrate para leer el documento completo.