punto isoelectrico de la caseina

DETERMINACIÓN DEL PUNTO ISOELÉCTRICO DE LA CASEÍNA
Andrés Achicanoy, Luis Muñoz, Yexon Erazo
Facultad de ciencias pecuarias, Programa de zootecnia (Universidad de Nariño)
Pasto (Nariño-Colombia)
Aandres025@gmail.com
luiscar.93@hotmail.com
yexonerazo@gmail.com
2014
Resumen: Para determinar el punto isoeléctrico de la caseína, inicialmente se calentó la leche, y a 150 ml de agua destiladase le agregaron 50 ml de leche, se le agrego Acido Acético 2M esto con el fin de aislar a la caseína del medio lácteo. Posteriormente se pudo observarse un precipitado blanco en el medio, la leche se cortó. Se dejó precipitar por un momento la mezcla, seguidamente se procedió a filtrarla sobre papel filtro, el filtrado se lo desecho, y el precipitado que quedo sobre el papel filtro se lo condujo auna estufa. Al sacarlo de la estufa el precipitado se formó duro y su peso fue de 4.35grAntes de eso e papel filtro fue pesado1.6gr, con el fin de saber cuál es el valor en Gr de la caseína después de seca2.75gr valor caseína. Seguidamente para la preparación de la caseína se agregaron 250 mg de caseína en un Erlenmeyer y a este, 20 ml de agua destilada y 5ml NaOH 1N, se agito un tiempodeterminado para obtener la caseína, este proceso fue un poco demorado luego se adiciono 5ml de ácido acético y se diluyo en agua destilada, obtuvimos una solución limpia y de color cristalino.
Por último para identificar el pH de la caseína, se rotularon 9 tubos de ensayo con reactivos de distintas concentraciones, y valores en ml: agua, ácido acético 0,01N, ácido acético 0,1N y ácido acético 1N.Seguidamente se tomó e valor de pH de cada tubo con el papel indicador, y por último a cada tubo se le agrego 1ml de solución de caseína y se dejó reposar por un tiempo determinado.
Introducción: El punto isoeléctrico es el punto en el cual el número de cargas positivas, en la molécula proteica, iguala al número de cargas negativas, la caseína en la leche es una proteína del tipo fosfoproteína quesepara la leche por acidificación, formando un precipitado blanco. Las fosfoproteínas son un grupo de proteínas que están químicamente unidas a una sustancia que contiene acido fosfórico, por lo tanto su molécula contiene un elemento fosforo. 1

La caseína representa del 77 al 82% de las proteínas presentes en la leche y el 2,7 en su composición de la leche líquida. Cuando coagula con la renina, esllamada paracaseína y cuando coagula a través de la reducción del pH es llamada acida, cuando no está coagulándose se llama caseinógeno. La caseína se dispersa bien en un medio alcalino como una solución acuosa de hidróxido de sodio (NaOH) formando caseinatos de sodio.

Materiales y Métodos
Durante el aislamiento de la caseína se calentó a 38°C, un vaso de precipitados con 150ml de aguadestilada añadiendo 50 ml de leche en constante agitación y acido acético 2M obteniendo un precipitado blanco, para ello se decanto y filtro sobre papel para ser secado con papel absorbente. Posteriormente en la preparación de la caseína con un Erlenmeyer de 150ml se agrego 250mg de caseína, 20ml de agua destilada y 5ml de NaOH 1N con constante agitación hasta lograr una solución total, por último serotulo en nueve tubos de ensayo agregando reactivos diferentes con distintos volúmenes para ser llevados a la prueba de pH y grado de turbidez para cada respectiva muestra.
Resultados y discusión
Para la determinación del punto isoeléctrico de la caseína, se dispuso de 9 tubos de ensayo que contenían 1 ml de caseína en acetato de sodio a distintas concentraciones, deduciendo que a mayorconcentración de ácido acético, el pH disminuía y la turbidez y/o precipitación de las soluciones variaba hasta llegar a un pH final de $$.

Tabla.1 pH resultante
Reactivos
1
2
3
4
5
6
7
8
9
Agua
8,38
7,75
8,75
8,5
8,0
7,0
5,0
1,0
7,4
Ac acético 0.01N

0,60

0,60

1,25

--

--

--

--

--

--
Ac acético 0.1N

--

--

0,25

0,5

1,0

2,0

4,0

8,0...