Química

Páginas: 6 (1393 palabras) Publicado: 29 de enero de 2015
Universidad Anáhuac Mayab
Escuela de Odontología
Práctica #1 Tinción de Gram y Tinción de Ziehl-Neelsen (BAAR)
22 de enero de 2015




2do Semestre
ECOLOGIA

Resumen

En los procedimientos para esta práctica fue necesario hacer uso de un microscopio, portaobjetos, etc. Como primer paso lo que hicimos fue tomar la muestra de comida en descomposición, la colocamos en el portaobjetos y posteriormente le colocamos azul de metileno, cristal violeta y safranina. Estos colorantes nos ayudan a observar mejor los microorganismos. En equipos se pudo hacer adecuadamente los pasos. Para la colocación de los colorantes fue necesario tener que esperar 1 minuto para poder pasar al siguiente, esto con el fin de promover la absorción. Al final con la ayuda del agua destilada observamoscon mejor nitidez los microorganismos.









Índice

• Marco teórico Pág. 4

• Planteamiento del problema Pág.7

• Objetivo Pág.7

• Materiales y reactivos Pág.7

• Métodos y procedimientos Pág.8

• Presentación de resultados Pág.11

• Análisis y discusión Pág.11

• Conclusiones Pág.12

• Referencias bibliográficas Pág.13



Marco Teórico
Tinciónde Gram
Esta tinción desarrollada por el doctor Christian Gram en 1884, es hoy la más utilizada en los laboratorios de bacteriología y permite, de acuerdo con la estructura y grosor de la pared bacteriana, agrupar las bacterias en Gram positivas y en Gram negativas. Las Gram positivas poseen una capa gruesa de peptidoglicán y carecen de membrana externa, mientras que las Gram negativas tienen unacapa más delgada de peptidoglicán y poseen una membrana externa.
Existen variaciones de esta técnica, pero en términos generales, la tinción de Gram involucra varios pasos:
1. Tinción inicial. Las células se tiñen con cristal violeta, el cual es el colorante primario. En este paso todas las células se tiñen de morado.
2. Mordente. Se adiciona el yoduro (lugol) que reacciona con el cristalvioleta y forma un complejo cristal violeta-yoduro. En este punto todas las células continúan de color morado.
3. Decoloración. Se adiciona un solvente no polar, el cual actúa lavando el complejo cristal violeta-yoduro de las células Gram negativas. De esta manera las bacterias Gram positivas continúan moradas y las Gram negativas quedan incoloras. Este es el paso crítico de esta tinción, pues si seexagera, decolora las Gram positivas y si se hace muy débil no decolora las Gram negativas.
4. Contratinción. Se vuelve a teñir con safranina o fucsina, de manera que las bacterias Gram negativas, que habían sido decoloradas, se tiñen de rosado a fucsia según el colorante empleado; en tanto, las bacterias Gram positivas no se afectan con la contratinción y permanecen moradas debido a lo intensode esta coloración.
Cristal violeta
El violeta de metilo, comúnmente denominado cristal violeta o violeta de genciana, es el nombre dado a un grupo de compuestos químicos empleados como indicadores de pH y colorantes. En medicina, el violeta de metilo 10B es conocido como violeta de genciana y es el ingrediente activo en el colorante de Gram, usado para clasificar bacterias.
Lugol
El lugoles un compuesto formado por I2 (yodo) en equilibrio con KI (yoduro de potasio) y Sl (Siulterio), los cuales están presente para solubilizar el yodo. En el caso de la tinción de Gram actúa de mordiente, haciendo que el cristal violeta se fije con mayor intensidad a la pared de la célula bacteriana.
Alcohol-acetona
La mezcla de alcohol-acetona que se agrega, sirve para realizar la decoloración, yaque en la misma es soluble el complejo I2/cristal violeta. Es un disolvente orgánico que se utiliza como lavado para eliminar colorante no fijado.
Safranina
La safranina, también llamada Safranina O o rojo básico 2, es un colorante biológico, de contraste, ya que se usa para diferenciar una estructura celular previamente teñida con otro colorante. Se utiliza en la Tinción de Gram para...
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