Quimica Biologica TP N 4 - Hidratos de Carbono

Trabajo Práctico Nº 4:
Hidratos de carbono

Objetivo:
Determinación de la composición cuali y cuantitativa de una muestra constituida por mono y/o disacáridos y/o ésteres fosfóricos decarbohidratos.

Materiales y métodos:
Ver “Guía de Trabajos Prácticos de Química Biológica 2013”, págs. 115 - 121.

Resultados:
*Se trabajó con la muestra correspondiente a la mesada 24

1) Identificacioncromatografica de hidratos de carbono:
Hidrólisis acida y TLC: fructosa y glucosa 1 o 6-fosfato.

2)Determinacion de azucares reductores (Somogyi-Nelson):















A530 = 0,738 μmol-1 X + 0,110

X7 =(0,390 - 0,110) / 0,738 μmol-1 = 0,380 μmol
[X]7 = n7 x V7 x F.dil = 0,380 μmol x 0,3 ml x 10 = 12,67 mM

X8 = (0,374 - 0,110) / 0,738 μmol-1 = 0,358 μmol
[X]8 = n8 x V8 x F.dil = 0,358 μmol x 0,3 mlx 10 = 11,93 mM

[X] = (12.67 + 11.93) / 2 = 12,30 mM

X9 = (0,349 - 0,110) / 0,738 μmol-1 = 0,325 μmol
C1 x V1 = C2 x V2
C2 = 0,325 mM x 1,5 ml / 0,4 ml = 1,217 mM
[X]9 = C2 x Fdil = 1,217 mM x 10 =12,17 mM

X10 = (0,340 - 0,110) / 0,738 μmol-1 = 0,312 μmol
C1 x V1 = C2 x V2
C2 = 0,312 mM x 1,5 ml / 0,4 ml = 1,171 mM
[X]10 = C2 x Fdil = 1,193 mM x 10 = 11,71 mM

[X] = (12,17 mM + 11.71 mM) / 2 =11,94 mM

3) Determinacion de cetosas (Roe)

Nº tubo
Absorbancia
Fructosa (μmol)
Glucosa (μmol)
Muestra (1/4) (ml)





1
-0,003
0,0
-
-
2
0,024
0,1
-
-
3
0,036
0,2
-
-
4
0,057
0,3
-
-
5
0,058
0,4-
-
6
0,085
0,5
-
-
7
0,070
-
-
0,3
8
0,097
-
-
0,3
9
0,008
-
0,3
-



A530 = 0,161 μmol-1 X + 0,003

X7 = (0,070 - 0,003) / 0,161 μmol-1 = 0,419 μmol
[X]7 = n7 x V7 x F.dil = 0,419 μmol x 0,3 ml x 4 =5,59 mM

X8 = (0,097 - 0,003) / 0,161 μmol-1 = 0,587 μmol
[X]8 = n8 x V8 x F.dil = 0,587 μmol x 0,3 ml x 4 = 7,82 mM

[X] = (5,59 mM + 7,82 mM) / 2 = 6,70 mM
PR = [glucosa-6P] + [fructosa][glucosa-6P] = PR - [fructosa]
[cetosas] = [fructosa]

[fructosa] = 6,70 mM
[glucosa-6P] = 5,24 mM

Análisis de resultados
Se logró determinar la composición cuali y cuantitativa de la muestra demostrándose...