Quimica Organica

CROMATOGRAFÍA

INTRODUCCIÓN
La cromatografía comprende un conjunto de técnicas que tienen como finalidad la separación de mezclas. De forma general, consiste en pasar una fase móvil (una muestra constituida por una mezcla que contiene el compuesto deseado en el disolvente) a través de una fase estacionaria. La fase estacionaria retrasa el paso de los componentes de la muestra, de forma que loscomponentes la atraviesan a diferentes velocidades y se separan en el tiempo. Cada uno de los componentes de la mezcla presenta un tiempo característico de paso por el sistema, denominado tiempo de retención. La separación cromatografía se consigue cuando el tiempo de retención del compuesto deseado difiere del de los otros componentes de la mezcla.

OBJETIVOS
* Separar por tamaño dossustancias de una mezcla aparentemente pura por el método de cromatografía en columna.

MARCO TEORICO
La cromatografía es un método usado principalmente para la separación de los componentes de una muestra, en el cual los componentes son distribuidos entre dos fases, una de las cuales es estacionaria, mientras que la otra es móvil. La fase estacionaria puede ser un sólido o un líquido soportado enun sólido o en un gel (matriz). La fase estacionaria puede ser empaquetada en una columna, extendida en una capa, distribuida como una película, etc.
La separación de los diferentes componentes de una mezcla que se encuentran en un líquido o gas es el resultado de las distribuciones diferenciadas de los solutos a medida que se desplazan alrededor o sobre una fase estacionaria líquida o sólida.Las diversas técnicas para la separación de mezclas complejas se fundamentan en la diversidad de afinidades de las substancias por un medio móvil gas o líquido y un medio absorbente estacionario (papel, gelatina, alúmina o sílice) a través del cual circulan.
Sistema cromatográfico
* Fase fija
* Fase móvil
* Componentes de la mezcla

Tipos de cromatografía
Según la naturaleza de lasfases:
a) De adsorción: es la capacidad de las superficies para fijar moléculas o la retención de una especie química por parte de los puntos activos de la superficie de un sólido quedando delimitado el fenómeno a la superficie que separa las fases o superficie interfacial.
b) De reparto o partición, tanto la fase móvil como la fase estacionaria son líquidos y lo que se establece sonpequeños equilibrios de distribución sucesivos entre dos fases líquidas. En este caso, además de una fase fija y una fase móvil debe existir un soporte adecuado para la fase fija. El caso más común es el de la cromatografía en papel: la celulosa actúa como soporte de pequeñas proporciones de agua que actúan como fase estacionaria, estableciéndose el equilibrio de partición entre el agua que hay enla celulosa y el solvente que actúa como fase móvil.
c) De intercambio iónico: Se trata de una cromatografía en columna que utiliza una fase estacionaria con carga. Se utiliza para separar compuestos cargados, incluyendo aminoácidos, péptidos y proteínas. La fase estacionaria es normalmente una resina de intercambio iónico que contiene grupos funcionales cargados que interaccionan con gruposcargados de signo opuesto del compuesto que se quiere retener. Puede ser:
* Intercambiador de iones cargado positivamente (intercambiador de aniones), que interacciona con aniones
* Intercambiador  de iones cargado negativamente (intercambiador  de cationes), que interacciona con cationes
Los compuestos retenidos se pueden eluir de la columna por gradiente de elución o por eluciónisocrática con un cambio de la concentración salina o del pH. La cromatografía de intercambio iónico es muy utilizada para purificar proteínas.

Según la técnica empleada y la naturaleza de las fases:
a) En columna (CC).

b) En capa fina (CCP) la fase estacionaria consiste en una capa delgada de un adsorbente (como por ejemplo gel de sílice, alúmina o celulosa) depositada sobre un...