Quimica

Técnicas de Cultivo
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I.- OBJETIVOS
Dominar y practicar la siembra de placas por estrías.
Reconocer la importancia del plaqueado y el flameado
II.- ANTECEDENTES:
Cuando se trata de estudiar la flora bacteriana de un cuerpo, suelo, agua, alimento o cualquier otra parte de nuestro medio ambiente se ha encontrado que la mayoría de las bacterias existen en poblaciones mixtas. Solamente enmuy raras situaciones es que estas se encuentran como especies simples .Para ser capaz de estudiar las características morfológicas y fisiológicas de un cultivo es esencial ante todo que los organismos sean separados de otras especies con las que normalmentes4e encuentran es su hábitat natural, es decir se debe obtener n cultivo puro del microorganismo.
Existen varios métodos para obtener uncultivo puro a partir de mezclas de cultivos. Los dos métodos mas frecuentemente usados involucran hacer una estría enuna placa o una sobre una placa. Ambas técnicas involucran el uso de pequeñas cantidades de microorganismos de tal forma que las especies individuales puedan ser seleccionadas de las otras.
INOCULACION DE LOS MEDIOS DE CULTIVO:
En microbiología se entiende por "siembra" la operaciónque consiste en depositar un germen asépticamente en un medio de cultivo.
Toda siembra debe adaptarse a los siguientes principios generales:
1. Practicarla en medios de cultivo favorable y previamente esterilizado.
2. Emplear instrumentos asépticos.
3. No contaminar ni destruir el inóculo,
4. Depositarla asépticamente en los medios elegidos.
5. Esterilizar os instrumentos empleados antes ydespués de cada operación.
El instrumento corrientemente empleado en las siembras son los siguientes:
El asa: Es un alambre de cromo níquel, tiene un diámetro de 0,3 a 1 mm. De diámetro y está sujeto a un mango de vidrio o de metal. El hilo puede terminar recto(aguja), en anillo (asa) o aplastado (espátula).
Los medios de cultivo, como ya se ha dicho, pueden ser sólidos o líquidos, y estarcontenidos en tubos, placas o frascos.
La técnica general de las siembras variará según el estado físico del material a sembrar y del medio de cultivo.
METODOS DE CULTIVO DE USO RUTINARIO:
Al inocular debe trabajarse siempre dentro del radio de un mechero Bunsen (30 cm.),o, en el ambiente dentro de una campana de flujo laminar, ya que, la corriente ascendente de aire que va por la llama, o lacorriente de aire del flujo laminar arrastra el polvo y otras partículas con el aire hacia arriba, o hacia afuera; impidiendo la contaminación del medio de cultivo.
El asa debe ser flameada adecuadamente y enfriada antes de tocar el inóculo, o el medio de cultivo.
1. Siembra en placas:
Con el asa ya esterilizada, se toma una gota de líquido o de una emulsión del producto patológico y se deposita enun costado del agar de una placa Petri, se estría a partir de ese punto pasando suavemente el asa en zig-zag por la superficie del agar sin rasparlo, rotar la placa en 1/3 y repetir el procedimiento 2 a 3 veces. A menudo se reciben tórulas para cultivo y con ellas se practica la primera de las estrías, procediendo después a diseminar con el asa o pipeta en la forma descrita.
2. Siembra en tubosde agar tendido:
El cuello del tubo debe ser flameado antes y después de ser sembrado. Con el asa previamente esterilizada a la llama, se toma una pequeña cantidad de la muestra y se lleva al fondo del tubo, luego se estría suavemente la superficie del medio en forma ondulante.
Antes de introducir el tubo a la estufa de cultivo, debe dejarse suelto el tapón de goma para evitar que los gasesexpulsen el tapón.
3. Siembra por picadura:
El inóculo es introducido con el asa recta o pipeta pasteur hasta el fondo del medio con un solo movimiento y teniendo cuidado en hacer el mismo trayecto de entrada que de salida. Debe flamearse la boca del tubo antes y después de la siembra. Antes de introducir el tubo a la estufa de cultivo debe soltarse el tapón de goma para evitar que los gases...