Quimica

Laboratorio de Química Analítica III
Cromatografía en columna.

En la cromatografía en columna la fase estacionaria esta contenida en un tubo estrecho y su fuerza el peso de la fase móvil atravesdel tubo, ya sea a presión o por gravedad. La fase estacionaria normalmente se encuentra dentro de una columna de vidrio de 0.5 a 3.0 cm de diámetro. Se utilizan muchas clases de materiales de empaqueque van desde la alumina, gel de sílice, tierra de diatomeas, hasta resinas sinteticas y derivados de polisacáridos. En la cromatografía en columna una muestra quse se introduce en la fase móvil estransportada a lo largo de la columna cilíndrica que contiene una fase estacionaria distribuida en forma homogénea. Las especies de la muestra experimentan interacciones repetidas entre la fase móvil yla fase estacionaria cuando ambas fases se han escogido en forma apropiada los componentes de la muestra se separan gradualmente en bandas en la fase móvil. Al final del proceso, los componentesseparadoa al emergen primero, el retenido mas fuertemente eluye al ultimo. El reparto entre las fases aprovecha las diferencias entre las propiedas físicas o químicas de los picos que sale después esretardado lo suficiente para impedir la sobreposicion con el pico que emergió antes. Debido a la introducción de cartuchos cortos de plástico y desechables preempacados con una variedad de fases deseparación con partículas de tamaño reativamente grandes, el uso de la cromatografía en columna se revoluciono para la purificación de biomoleculas ya sea para extraer las sustancias deseadas o bien para elanálisis de soluciones.
Practica 4.1. Empaquetamiento de Columnas para Cromatografía
Fundamento
La capacidad separadora de una columna cromatografía reside fundamentalmente en la matriz de la daseestacionaria, que consta de un gran numero de esferas porosas microscópicas. Cada matriz se caracteriza por un rango de fraccionamiento que depende del tamaño de sus poros. La matriz, una vez...