Quimica
ACTIVIDAD ENZIMATICA DE LA -AMILASA (PARTE I)
OBJETIVO: Investigar y analizar el comportamiento de la -amilasa frente a diferentes temperaturas y pH
1. INTRODUCCIÓNLa actividad de una enzima puede evidenciarse ya sea registrando la aparición de un producto o bien la desaparición de un sustrato. Para esto pueden usarse tests colorimétricos en donde la actividadenzimática puede detectarse a través de cambios en la coloración en el producto final de la reacción.
Investigar la actividad de una enzima implica determinar cuáles son las condiciones óptimaspara su actividad: pH, temperatura, concentración de sustrato y concentración de producto.
La -amilasa es una enzima que degrada el almidón, principal polisacárido de reserva de las plantas. Elalmidón está compuesto por monómero de glucosa.
La -amilasa rompe uniones entre los carbonos de dos glucosas. Por lo tanto, usando almidón como sustrato, libera como productos polisacáridos compuestospor unas pocas unidades de glucosa, en general disacáridos como la maltosa
En este TP, para analizar la actividad de la -amilasa, vamos a usar un test colorimétrico que permite revelar la presenciade almidón en una solución de Iodo (lugol). Es decir que se verificará la reacción de la enzima cuantificando la cantidad de almidón que se halla coloreado, esto implica que se cuantifica el sustratoque queda remanente después de exponer la enzima ya que el producto de la reacciónque es la maltosa, no se tiñe.
La reacción estudiada es:ENZIMA
SUSTRATO-------------------------PRODUCTO
AMILASA
ALMIDÓN--------------------------MALTOSA
El almidón en presencia del lugol presenta una coloración azuladadebido a la interacción física entre el iodo y las moléculas de almidón. Cuando la -amilasa degrada el almidón, elimina esa propiedad de interactuar con el iodo y, por lo tanto, de presentar coloración...
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