quimica

Instrucciones
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Corta la papaya de arriba hasta abajo con la navaja. Asegúrate de que el corte no tenga más de 2 mm de profundidad.
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Sostén la papaya sobre el plato de recolección y deja que el líquido gotee sobre el mismo. Esto debe hacerse durante seis minutos como mínimo. No aprietes la papaya para que salga el líquido.
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Coloca el plato de recolección en el horno de vacío.Enciéndelo a 104 grados Fahrenheit (40 grados centígrados). Deja que el líquido de la papaya se seque durante cinco horas. Sabrás que está listo cuando se vea quebradizo.
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Transfiere la papaína seca a una caja que esté forrada con polietileno. Esto puede hacerse raspando suavemente la papaína seca del plato de recolección con una cuchara de acero inoxidable. La caja debe tener una tapa, quedebe ser lo más hermética posible y debe guardarse en un lugar fresco y seco.













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Capítulo 1.- La papaína y su purificación
1.1 Generalidades
La papaína es una proteasa sulfhídrica (thiol proteasa) que tiene la
capacidad de hidrolizar los enlaces peptídicos donde los residuos de
aminoácidos aromáticos del grupo carbonil son arginina, lisina o
glutamina. Esanáloga en funciones a la pepsina (enzima que se
encuentra en el estómago humano y descompone las proteínas).
Balls (et al., 1937) desarrolló un proceso para la purificación y
aislamiento en estado cristalino de la papaína. Este método fue
modificado después por Kimmel & Smith (1954) usando látex seco
comercial. Con algunas modificaciones contribuyeron Arnon (1970),
Baines & Brocklehurst (1979).De acuerdo a Brocklehurst los extractos
acuosos del látex de Carica papaya contienen algunas cisteín-
proteasas, una de ellas la quimopapaína (PM= 27KD), que pueden ser
separadas por cromatografía. Estos antecedentes fueron descritos en el
trabajo de R.Monti13.
Para nuestro trabajo, se tomará la referencia experimental de los
métodos de purificación de papaína de R.Monti13 y de G. Glibota32.1.2 Propiedades
Es un polvo blanco o blanco-grisáceo. Tiene un olor ácido pungente y
algo agresivo. Es ligeramente higroscópico. Moderadamente soluble en
agua y glicerol y prácticamente insoluble en la mayoría de los solventes
orgánicos. Su temperatura óptima es de 65ºC y su rango de pH óptimo
está entre 5-7. Tiene un punto isoeléctrico de 9.6. El peso molecular es
23.4kD.
El tiempo devida útil es corto; por lo tanto, se debe mantener en
ambiente seco y frío. No congelar en suspensiones acuosas.

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Como material de embalaje se utilizan recipientes de polietileno o
acero inoxidable pues la papaína es potencialmente peligrosa; el
contacto prolongado con esta produce daños en la piel de los
trabajadores incluso reacciones alérgicas.
Los enzimas vegetales no producenfenómenos tóxicos cuando se
administran por vía oral. La administración por vía inyectable puede
producir disminución de la coagulación y fenómenos de
hipersensibilidad.
1.3 Elección de una estrategia de purificación
El manual de purificación de proteínas de Amersham Pharmacia
Biotech
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nos da una guía para purificar un enzima; nos recomienda
la elección de una estrategia de purificacióny la cual se define
como las técnicas experimentales escogidas, de acuerdo a un orden
lógico, que nos permiten cumplir los objetivos de purificación de un
enzima.
La elección de una estrategia de purificación debe estar en función de
un número mínimo de pasos y el diseño más simple posible.
El primer paso para elegir una estrategia de purificación es
describir el escenario básico para lapurificación y tomar en cuenta
consideraciones generales tales como ambiente apropiado de trabajo,
disponibilidad de reactivos y métodos experimentales adecuados.
Luego, una de las formas de organizar el trabajo experimental
deviene del planteamiento de las siguientes interrogantes: ¿Cuál es el
uso del producto? ¿Qué clase de material de partida está disponible y
cómo debe ser manejado?...