quimica

Universidad Nacional Autónoma de Honduras

UNAH

Facultad De Ciencias Quimicas Y Farmacias

Departamento De Control Quimico Farmaceutico

Analisis de Drogas y Medicamentos

Electroforesis Capilar

Dr. Nahum Lanza

Integrantes:
Katerin Valeriano Garcia 20091012087
Karen Gisselle Castro 20101000269
Lourdes Raquel Hernandez 20091001887
Seccion: 7:01
Tegucigalpa M.D.C05 /08/2014




Electroforesis Capilar
Técnica de separación que se basa en la diferencia de movilidad o velocidad de migración de partículas cargadas debido a la acción de un campo eléctrico.
Campo eléctrico E
Voltaje aplicado por unidad de longitud del medio de separación
Medio de separación
Conductor de la corriente eléctrico
Controla la carga eléctrica
Electroforesis
Técnica deseparación basada en el movimiento de los analitos en un medio conductivo en respuesta a la aplicación de un campo eléctrico.
El medio conductivo es generalmente una disolución tampón.
En ausencia de otros factores, las especies catiónicas migran hacia el cátodo (electrodo -) y las especies aniónicas migran hacia el ánodo (electrodo +).
La velocidad de migración es una relacióndirecta entre el tamaño y la carga de cada especie. Voltaje aplicado por unidad de longitud del medio de separación
Electroforesis
Dependiendo de la presencia o ausencia de soporte o medio de estabilización, podemos hacer dos claras

Métodos en solución libre
La muestra se introduce en un tubo en forma de U el cual está rellenado de una disolución tampón.
No existe sistema de soporte o medio deestabilización.
Cuando se aplica el campo eléctrico las especies migran en función de su relación carga/masa.

Métodos con soporte o medio de estabilización
Presencia de un medio soporte como papel, gel o un material empaquetado.
La muestra es colocada físicamente sobre el soporte.
Existe una disolución que cubre totalmente el soporte o medio de estabilización.

Electroforesis EnPapel
El soporte utilizado en este caso es un papel
El papel está introducido en una disolución acuosa tamponada.
La muestra se sitúa en un punto determinado del soporte.
Un potencial de corriente continua (100-1000V) es generalmente aplicado durante la separación (las corrientes medidas suelen ser del orden de mA).
Las especies iónicas migran hacia puntos específicos del soporte.
Después deun tiempo apropiado para la separación el soporte es retirado y secado.
En caso de ser necesario, el papel es tratado con un agente colorante con el fin de observar las bandas de desplazamiento






Electroforesis Convencional






Dos son los factores que causan la movilidad de los solutos:

Movilidad Electroforética
Específica para cada soluto o analito.Dependiente de la relación carga/tamaño.
Los cationes migran hacia el cátodo, los aniones al ánodo y los compuestos neutros no se ven afectados por el campo eléctrico.
Flujo Electrosmótico
Movimiento general de todo lo existente en el interior del capilar como consecuencia del campo eléctrico aplicado.
Bajo condiciones normales, el movimiento global es hacia el cátodo.
Su componente develocidad es mayor, en general, que las componentes electroforéticas de los solutos a separar.

Movilidad Electrosmótica
Los cationes del tampón son atraídos hacia la pared del capilar, resultando la formación final de una doble capa de cationes.
La capa interna “capa fija”, está constituida por cationes fuertemente enlazados al capilar.
La capa externa “capa móvil”, es una capa con un enlacemás débil.
Al aplicar el campo eléctrico, la capa móvil migra hacia el cátodo.
La disolución que rellena la columna es arrastrada por esta capa móvil en la dirección del cátodo.





Fenómenos electrocinéticos:
Movilidad electroforética
Flujo electroforético
Movilidad electroforética efectiva





Ventajas de la EC
Elevada eficacia, alcanzándose de 105 a 106 platos teóricos....