Quimico Bacteriologo

VALIDACIÓN SECUNDARIA DEL MÉTODO DE RECUENTO EN PLACA EN
SUPERFICIE DE Bacillus cereus Y Staphylococcus aureus EN MUESTRAS
DE ALIMENTOS EN UN LABORATORIO DE REFERENCIA

JOSÉ ESTEBAN PADILLA GONZÁLEZ

TRABAJO DE GRADO
Presentado como requisito parcial
Para optar al titulo de

Microbiólogo Industrial

PONTIFICIA UNIVERSIDAD JAVERIANA
FACULTAD DE CIENCIAS
CARRERA DE MICROBIOLOGIAINDUSTRIAL
BOGOTÁ D.C.
2007

NOTA DE ADVERTENCIA

Artículo 23 de la Resolución Nº 13 de Julio de 1946

“La Universidad no se hace responsable por los conceptos emitidos por sus
alumnos en sus trabajos de tesis. Sólo velará por que no se publique nada
contrario al dogma y a la moral católica y por que las tesis no contengan
ataques personales contra persona alguna, antes bien se vea en ellasel anhelo
de buscar la verdad y la justicia”.

VALIDACIÓN SECUNDARIA DEL MÉTODO DE RECUENTO EN PLACA EN
SUPERFICIE DE Bacillus cereus Y Staphylococcus aureus EN MUESTRAS
DE ALIMENTOS EN UN LABORATORIO DE REFERENCIA

JOSÉ ESTEBAN PADILLA GONZÁLEZ

APROBADO

___________________________
Fernando Murcia, Microbiólogo.
Director

VALIDACIÓN SECUNDARIA DEL MÉTODO DE RECUENTO EN PLACA ENSUPERFICIE DE Bacillus cereus Y Staphylococcus aureus EN MUESTRAS
DE ALIMENTOS EN UN LABORATORIO DE REFERENCIA

JOSÉ ESTEBAN PADILLA GONZÁLEZ

APROBADO

___________________________
Fernando Murcia, Microbiólogo.
Director

_____________________________
María Clara Méndez, Microbióloga
Jurado

_______________________
Adriana Páez, Microbióloga
Jurado

VALIDACIÓN SECUNDARIA DELMÉTODO DE RECUENTO EN PLACA EN
SUPERFICIE DE Bacillus cereus Y Staphylococcus aureus EN MUESTRAS
DE ALIMENTOS EN UN LABORATORIO DE REFERENCIA

JOSÉ ESTEBAN PADILLA GONZÁLEZ

APROBADO

__________________________
Angela Umaña Muñoz, M. Phil
Decana Académica

_______________________
David Gómez Méndez, Msc
Director de carrera

TABLA DE CONTENIDO
Pág.
RESUMEN

1

1. INTRODUCCIÓN2

2. MARCO TEORICO Y REVISIÓN DE LITERATURA

5

2.1 Generalidades de la validación
2.1.1 Validación

7
8

2.1.2 Validación Primaria

10

2.1.3 Validación secundaria

11

2.1.4 Tipos de validación

11

2.1.4.1 Validación prospectiva

11

2.1.4.2 Validación retrospectiva

12

2.1.4.3 Validación concurrente

12

2.1.4.4 Revalidación

13

2.1.5 Parámetrosanalíticos para la validación de una técnica o método

14

2.1.5.1 Precisión

14

2.1.5.2 Selectividad

15

2.1.5.3 Especificidad

15

2.1.5.4 Linealidad

16

2.1.5.5 Exactitud

16

2.1.5.6 Estabilidad

16

2.1.5.7 Limite de detección

16

2.1.5.8 Limite de cuantificación

16

2.2 Microorganismos de estudio

17

2.2.1 Bacillus cereus

17

2.2.2Staphylococcus aureus

19

2.3 Toma de muestras y análisis microbiológico de alimentos

21

2.3.1 Toma de muestras

21

2.3.2 Análisis microbiológico de alimentos

23

2.4 Recuento y siembra en placa por superficie

24

2.4.1 Método de recuento en placa en superficie de Bacillus cereus

24

2.4.2 Método de recuento en placa en superficie de Staphylococcus aureus
coagulasa positiva2.5 Control en la validación de los métodos

25
26

3. FORMULACIÓN DEL PROBLEMA Y JUSTIFICACIÓN

28

4. OBJETIVOS

29

4.1 Objetivo general

29

4.2 Objetivos específicos

29

5. MATERIALES Y METODOS

30

5.1 Control de calidad de los medios de cultivo

30

5.2 Verificación del control de equipos

32

5.3 Control de ambientes

32

5.4 Validación secundaria delmétodo de recuento en placa en superficie

33

5.4.1 Dilución y homogeneización de las muestras

33

5.4.2 Recuento en placa en superficie de Bacillus cereus

34

5.4.3 Recuento en placa en superficie de Staphylococcus aureus coagulasa
positiva
5.4.4 Evaluación de la validación
5.5 Informe de resultados

6. RESULTADOS Y DISCUSION

34
35
36

37

6.1 Control de calidad de...