Quimico
Páginas: 62 (15489 palabras)
Publicado: 23 de enero de 2013
PURIFICACIÓN DEL FIBRINÓGENO HUMANO Y EL PLASMINÓGENO DE CUATRO ESPECIES: HUMANO, BOVINO, CAPRINO Y PORCINO, PARA LA DETERMINACIÓN DEL TIEMPO DE FORMACIÓN Y LISIS DEL COAGULO HUMANO (IN VITRO) CON CADA PLASMINÓGENO/PLASMINA.
DIEGO ANDRÉS ROJAS
UNIVERSIDAD DE PAMPLONA FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS DEPARTAMENTO DE BIOLOGÍA Y QUÍMICA PAMPLONA 2012
PURIFICACIÓN DEL FIBRINÓGENO HUMANO Y ELPLASMINÓGENO DE CUATRO ESPECIES: HUMANO, BOVINO, CAPRINO Y PORCINO PARA LA DETERMINACIÓN DEL TIEMPO DE FORMACIÓN Y LISIS DEL COAGULO HUMANO (IN VITRO) CON CADA PLASMINÓGENO/PLASMINA.
DIEGO ANDRÉS ROJAS Trabajo de grado para optar el título de química
DIRECTOR LUIS FERNANDO ARBELÁEZ RAMÍREZ Ph.D.
CODIRECTORA OMAIRA CAÑAS BERMÚDEZ M.Sc.
UNIVERSIDAD DE PAMPLONA FACULTAD DE CIENCIASBÁSICAS DEPARTAMENTO DE BIOLOGÍA Y QUÍMICA PAMPLONA 2012
DEDICATORIA
A mi madre Araminta Rojas, lo único valioso y verdadero sobre la tierra…
AGRADECIMIENTOS
Al Dr.Luis Fernando Arbeláez Ramírez, por haber aceptado ser el director de mi trabajo de grado, por darme la oportunidad de trabajar en su laboratorio, por la confianza que me tuvo en el momento que más lo necesite, por enfocarmea la investigación, gracias por afinar mi profesionalismo por medio de sus valiosos consejos, por ser un ejemplo de persona con sus excelentes cualidades éticas e intelectuales.
A M.Sc. Omaira Cañas Bermúdez, por ser mi codirectora, por brindarme su amistad, por los consejos que me brindo en las labores de laboratorio y personales.
A Tatiana Garcés gracias por su amistad, por ayudarme yaconsejarme ante inquietudes y problemas que se me presentaban en el área de trabajo.
También quiero agradecer a mis hermanos, tíos y tías y a mis primos por sus ánimos y buenos deseos para la culminación de este trabajo.
CONTENIDO
1. MARCO REFERENCIAL .................................................................................. 19
1.1 Coagulación sanguínea................................................................................ 19 1.1.1 Sistema extrínseco ..................................................................................... 20 1.1.2 Sistema intrínseco ..................................................................................... 23 1.1.3 Inhibidores fisiológicos de la coagulación .............................................. 24 1.1.4Fibrinólisis .................................................................................................. 25 1.1.5 Plasminógeno ............................................................................................. 26 1.1.6 Activador tisular del plasminógeno .......................................................... 29 1.1.7Fibrinógeno................................................................................................. 31
1.2 Técnicas de laboratorio ................................................................................ 37 1.2.1 Purificación por Cromatografía ................................................................ 37 1.2.1.1 Cromatografía de afinidad ......................................................................... 38 1.2.2Electroforesis ............................................................................................. 39 1.2.2.1 Electroforesis en geles de poliacrilamida (SDS-PAGE) de tipo Discontinuo. .............................................................................................................................. 39
1.2.3 Precipitación fraccionada de proteínas con solventes orgánicos ......... 402. OBJETIVOS ...................................................................................................... 41
2.1 Objetivo general ............................................................................................ 41
2.2 Objetivos específicos.................................................................................... 41
3. METODOLOGÍA EXPERIMENTAL...
DIEGO ANDRÉS ROJAS
UNIVERSIDAD DE PAMPLONA FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS DEPARTAMENTO DE BIOLOGÍA Y QUÍMICA PAMPLONA 2012
PURIFICACIÓN DEL FIBRINÓGENO HUMANO Y ELPLASMINÓGENO DE CUATRO ESPECIES: HUMANO, BOVINO, CAPRINO Y PORCINO PARA LA DETERMINACIÓN DEL TIEMPO DE FORMACIÓN Y LISIS DEL COAGULO HUMANO (IN VITRO) CON CADA PLASMINÓGENO/PLASMINA.
DIEGO ANDRÉS ROJAS Trabajo de grado para optar el título de química
DIRECTOR LUIS FERNANDO ARBELÁEZ RAMÍREZ Ph.D.
CODIRECTORA OMAIRA CAÑAS BERMÚDEZ M.Sc.
UNIVERSIDAD DE PAMPLONA FACULTAD DE CIENCIASBÁSICAS DEPARTAMENTO DE BIOLOGÍA Y QUÍMICA PAMPLONA 2012
DEDICATORIA
A mi madre Araminta Rojas, lo único valioso y verdadero sobre la tierra…
AGRADECIMIENTOS
Al Dr.Luis Fernando Arbeláez Ramírez, por haber aceptado ser el director de mi trabajo de grado, por darme la oportunidad de trabajar en su laboratorio, por la confianza que me tuvo en el momento que más lo necesite, por enfocarmea la investigación, gracias por afinar mi profesionalismo por medio de sus valiosos consejos, por ser un ejemplo de persona con sus excelentes cualidades éticas e intelectuales.
A M.Sc. Omaira Cañas Bermúdez, por ser mi codirectora, por brindarme su amistad, por los consejos que me brindo en las labores de laboratorio y personales.
A Tatiana Garcés gracias por su amistad, por ayudarme yaconsejarme ante inquietudes y problemas que se me presentaban en el área de trabajo.
También quiero agradecer a mis hermanos, tíos y tías y a mis primos por sus ánimos y buenos deseos para la culminación de este trabajo.
CONTENIDO
1. MARCO REFERENCIAL .................................................................................. 19
1.1 Coagulación sanguínea................................................................................ 19 1.1.1 Sistema extrínseco ..................................................................................... 20 1.1.2 Sistema intrínseco ..................................................................................... 23 1.1.3 Inhibidores fisiológicos de la coagulación .............................................. 24 1.1.4Fibrinólisis .................................................................................................. 25 1.1.5 Plasminógeno ............................................................................................. 26 1.1.6 Activador tisular del plasminógeno .......................................................... 29 1.1.7Fibrinógeno................................................................................................. 31
1.2 Técnicas de laboratorio ................................................................................ 37 1.2.1 Purificación por Cromatografía ................................................................ 37 1.2.1.1 Cromatografía de afinidad ......................................................................... 38 1.2.2Electroforesis ............................................................................................. 39 1.2.2.1 Electroforesis en geles de poliacrilamida (SDS-PAGE) de tipo Discontinuo. .............................................................................................................................. 39
1.2.3 Precipitación fraccionada de proteínas con solventes orgánicos ......... 402. OBJETIVOS ...................................................................................................... 41
2.1 Objetivo general ............................................................................................ 41
2.2 Objetivos específicos.................................................................................... 41
3. METODOLOGÍA EXPERIMENTAL...
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