Quimiolitotrofia

Páginas: 7 (1605 palabras) Publicado: 27 de mayo de 2012
HIPOTESIS.
Si las bacterias Thiobacillus thiooxidans y Thiobacillus ferrooxidans, son quimiolitotróficas, crecen en compuestos inorgánicos como fuente de energía entonces en condiciones de crecimiento en agitación y estacionario, habrá un mayor crecimiento en los cultivos que estuvieron en agitación.
OBJETIVO GENERAL.
Medir el crecimiento de las bacterias quimiolitotróficas Thiobacillusthiooxidans y Thiobacillus ferrooxidans en diferentes condiciones de incubación, comprando matraces inoculados y no inoculados con las cepas.
OBJETIVOS ESPECIFICOS.
* Medir el crecimiento de las bacterias en diferentes medios (A, B y C).
* Determinar la concentración de azufre residual para el medio A.
* Determinación de la concentración de asure de sulfatos en el medio A.
*Determinación de la concentración de tiosulfato residual en el medio B.
* Determinación del ios ferroso en el medio C.
* Determinar el pH para cada condición (medio A, medio B y medio C.)
* Determinar la ácidez titulable para los medios A y B.

DISENO EXPERIMENTAL.
a) Obtención de los cultivos
Se prepararon 3 series de 4 matraces cada una con los medios A, B y C. Dos matraces de cada seriefueron inoculados con un cultivo resiente de T. thiooxidans para el medio A, para el B uno de T. thioparus, y para el medio C T.ferroxidans.
La incubación de los matraces a 30°C se llevo a cabo del siguiente modo:

Figura 1. Elaboración de los medios de cultivo A, B y C. Sometidos a dos condiciones de incubación: agitación y estacionaria.
Esto con en el fin de poner de manifiesto elcomportamiento quimiolitotrofo de cada una de las cepas usadas, en los medios en cuales fueron cultivados.
Tabla 1. Fuentes de Energía Utilizada en los Medios de Cultivo.

Medio | Fuente de energía | Cepa | Reacción |
A | Azufre elemental (S0) | T. thiooxidans | S0+ H2O+112O2 SO42-+H2O |
B | Tiosulfato de sodio (Na2S2O3) | T. thiooxidans | S2O32-+ H2O+2O2 2 SO42-+2H+ |
C |Sulfato de ferroso penta hidratado (FeSO4.7H2O) | T. ferroxidans | 2Fe2++ 12O2 +2H+ 2Fe3++H2O |


b) Determinación del crecimiento de los microorganismos en:

MEDIO A

1. Determinación de Azufre Residual.

De acuerdo con lo explicado en la sección, a los 4 matraces correspondientes al medio A, y que en su caso contenían o no el inoculo del microorganismo Thiobacillusthiooxidans, en condiciones oxigenicas de agitación o estacionario, se les determino la cantidad de azufre residual.

Para lo cual se filtro el contenido de cada uno de los matraces correspondientes al medio A, se midió el volumen del filtrado en una bureta, con la finalidad de determinar la cantidad de azufre de sulfatos y la acidez titulable, en base a la cantidad total de medio contenido endicho matraz.

El papel filtro utilizado fue previamente llevado a peso constante para evitar interferencias por presencia de humedad u otros contaminantes, y pesado en balanza analítica. Posteriormente el papel filtro con el azufre residual fue desecado en una estufa a 60°C hasta obtener peso constante. Posterior a la desecación fue pesado y se determino la cantidad de azufre residual mediante unadiferencia de pesos, de acuerdo a la siguiente formula.

mg de azufre residual | = | mg de azufre contenido en papel filtro(peso constante) | - | mg de papel filtro(peso constante) |

Para determinar la cantidad de azufre que fue utilizado como fuente de energía por Thiobacillus thiooxidans se realizo la diferencia entre la cantidad de azufre residual obtenido en aquellos matraces noinoculados con el microorganismo y la cantidad de azufre residual obtenido en matraces inoculados, en condiciones de agitación y estacionarios (respectivamente).

Para determinar la cantidad de azufre utilizado empleamos la siguiente formula:
mg de azufreutilizado | = | mg de azufre residual en matraz no inoculado(agitación) | - | mg de azufre residual en matraz inoculado(agitación) |
2. Acidez...
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