Quitosan como inmovilizador

β-Glucosidasa de soya inmovilizada en perlas de quitosan y su aplicación en el incremento de
agliconas en bebidas de soya



Introducción
Hidrolizan enlaces glicosidicos, encontradas de manera natural,
sintetizadas por plantas, y generada por animales y
microorganismos.

-Glucosidasa

Contiene isoflavonas glucosídicas:
Daidzina, genistina, glicitina,
hidrolizados porb-Glucosidasa y liberar las agliconas:
daidzeína, genisteína y gliciteina.
Las agliconas exhiben mayor actividad biológica son más
metabolizables; mayor absorción y más rápido que los
glucósidos.

(Izumi et al. 2000).

Isoflavonas
Asociadas a la prevención y reducción del riesgo de contraer: Cáncer de mama y próstata
(Liggins et al. 2000), osteoporosis y síntomas de menopausia (Levis et al.2010), enfermedades
cardiovasculares (Rimbach et al. 2008) mejora la memoria (Lephart et al., 2002) actividad
antioxidante (Ma et al 2010).
La soya contiene 2% de las agliconas en relación de las isoflavonas totales (Matsuura y Obata 1993).

Inmovilización
La aplicación de enzimas inmovilizadas es una estrategia para bioprocesos continuos y puede
mejorar la eficiencia de los procesosbiotecnológicos con reducción en los costes de producción.
(Chang y Juang 2007)
Este proceso aumenta la estabilidad de la enzima y facilita la separación del producto de
reacción (Su et al 2010).
Métodos químicos y físicos se utilizan para la inmovilización de una enzima y deben ser
materiales fácilmente disponibles y de abundancia, de bajo costo, fácil operación a gran escala,
elevada capacidad deretención (Nagashima 1984).
El soporte de activación con glutaraldehído es un método simple y eficiente que mejora la
estabilidad de la enzima debido a vinculación o entre las subunidades de la enzima (Betancor et
al. 2006).

Quitosano
Es un soporte adecuado (Gomathi et al 2010).

La eficiencia inmovilización depende de factores tales
como el pH, el tiempo de agitación y tiempo de espera(Cao 2006; Shing 2009; Sheldon 2011).

Biocompatible
No tóxico
Biodegradable
Resistente a modificaciones químicas
Disponible formas diversas

Gel
Membrana
Fibra
Pelicula

Por lo tanto, el quitosano tiene potencial para su aplicación como biomaterial (Arnaud et al. 2010).

Justificación
Debido a la cantidad de isoflavonas contenidas en la soya y al ser la β-glucosidasa inmovilizadaen la elaboración de productos alimentarios de soya pueden ser una alternativa para promover
la bioconversión de las isoflavonas a agliconas con el fin de producir alimentos con contenidos
más altos agliconas.
La inmovilización de la β-glucosidasa y su aplicación no se ha descrito.

Objetivo
El objetivo de este estudio fue investigar la inmovilización
de β-glucosidasa de soya en quitosanoy evaluar su
aplicación en la bebida de soya comercial para aumentar la
aglicona.

Materiales y métodos
Materiales:
Soya BRS 213, desarrollado en la Empresa Brasileña de Investigación Agropecuaria,
Los granos se molieron (100 mesh) (TE 631, Tecnal, Brasil) obtener una harina finamente
granulométrica.
La leche de soja se obtiene a partir de un centro comercial local.

MetodosExtracción de β-glucosidasa de la harina de soya
Actividad de la β-glucosidasa
Diseño experimental para la activación de perlas de quitosano con glutaraldehído
Diseño experimental para la inmovilización de β-glucosidasa sobre perlas de quitosano activadas
con glutaraldehído.
Análisis estadístico
Bebida de soya comercial con inmovilizados de β-glucosidasa
Determinación del contenido de isoflavonaspor HPLC

Extracción de β-glucosidasa de la
harina de soya
• El extracto crudo se precipitó primero con
sulfato de amonio a 4ºC y la saturación de 40%.
• centrifugación a 4000 rpm a 4ºC durante 15
min,
• se añadió sulfato de amonio al sobrenadante
hasta saturación de 85%
• centrifugó de nuevo en las mismas condiciones.
• Los precipitados se resuspendieron en un bufer
fosfato de...