Radioinmunoanalisis
Páginas: 15 (3710 palabras)
Publicado: 11 de diciembre de 2011
RADIOINMUNOANALISIS.
El radioinmunoanálisis (RIA) consiste en una técnica de laboratorio de análisis clínico. Usa isótopos radioactivos, es in vitro, es decir, se extrae la sangre del paciente y es analizada para ver sustancias.
Es una técnica que nace en los años 60-70, propiciando un gran avance de la endocrinología. Es una técnica muy sensible, mide pequeñas cantidades de sangre.
Cualquiersustancia del organismo puede ser considerada un antígeno. Los anticuerpos que se transforman sirven para medir la cantidad de hormonas que hay en el organismo. Así se miden:
* Hormonas peptídicas: T3, T4, TSH, GH...Casi todas las hormonas hipofisarias.
* Hormonas no peptídicas: Estrógenos, testosterona...Hormonas sexuales.
* Sustancias no hormonales que pueden considerarse comoantígenos: Marcadores tumorales digoxina, medicamentos.
* RESUMEN.
* Se describen diversos procedimientos utilizados
* para manejar datos de radioinmunoanálisis (RIA) y
* se presentan las bases del ventajoso y sencillo enfoque
* del Dr. Grafton Chase para el mismo fin. Entre las
* principales características de éste destacan el sistema
* interno de control de calidad quecontiene, además
* de que no oculta errores experimentales pues no
* comprime las escalas de la curva de calibración, a la
* vez que permite identificar puntos sospechosos en
* ésta. Se comentan factores importantes del RIA
* relacionados con el manejo de los datos, como son
* las diferencias entre el RIA en equilibrio y el RIA
* secuencial, el concepto de sensibilidad delanálisis, la
* especificidad del anticuerpo y la conveniencia de
* verificar la calidad del ensayo utilizando los patrones
* mismos con que se construye la curva de calibración
* en vez de emplear controles. Se presentan ejemplos
* con datos típicos proporcionados por fabricantes de
* reactivos y con datos obtenidos en el laboratorio.
* También se describe la aplicacióndel procedimiento
* del Dr. Chase al análisis inmunorradiométrico.
* (Rev Biomed 2002; 13:277-287)
Solicitud de sobretiros: Q.F.B. Jorge H. Alvarez-Cervera, Laboratorio de Radioinmunoanálisis, Calle 3 No. 399 entre 1 y 6, Col. Díaz Ordaz,
C.P. 97130, Mérida, Yucatán, México.
* Recibido el 12/Julio/2001. Aceptado para publicación 18/Octubre/2001
* Este artículo está disponible enhttp://www.uady.mx/~biomedic/rb021337.pdf
En este ensayo se incorpora una reacción de enlace competitivo, en la que una cantidad fija de antígeno marcado radiactivamente y antígeno de la muestra compiten por un número limitado de sitios de enlaces específicos con el anticuerpo. La unión de los dos antígenos con el anticuerpo forma un complejo precipitable. El porcentaje de antígeno marcado quese precipitadisminuye a medida que la concentración de antígeno no marcado en la muestra aumenta. Por tanto, la concentración de antígeno en la muestra problema es inversamente proporcional a la cantidad de radioactividad de la fracción enlazada.
Sea antígeno (Ag) la sustancia que quiere medirse, Ag* la misma sustancia que contiene en su molécula un isótopo radioactivo y el anticuerpo (Ac)que reacciona específicamente con los anteriores y que se encuentra en una cantidad insuficiente para unir todas las moléculas de antígeno presente. Si se incuba una muestra que contenga Ag, Ag* y Ac, los dos Ag y Ag* compiten por su unión con Ac.
Tras producirse la reacción, se separan los antígenos unidos (Ag-Ac, Ag*-Ac) de los libres Ag*, Ac). Una vez separados se mide la radioactividad delas fracciones unida y libre. Utilizando curvas de calibración obtenidas con patrones de los que se conoce la concentración de Ag, es posible mediante la relación entre el Ag libre y unido calcular la concentración de Ag en la muestra problema.
Los métodos de separación del Ag libre y unido pueden agruparse en tres tipos:
* Método de adsorción
El Ag libre se retiene superficialmente en...
El radioinmunoanálisis (RIA) consiste en una técnica de laboratorio de análisis clínico. Usa isótopos radioactivos, es in vitro, es decir, se extrae la sangre del paciente y es analizada para ver sustancias.
Es una técnica que nace en los años 60-70, propiciando un gran avance de la endocrinología. Es una técnica muy sensible, mide pequeñas cantidades de sangre.
Cualquiersustancia del organismo puede ser considerada un antígeno. Los anticuerpos que se transforman sirven para medir la cantidad de hormonas que hay en el organismo. Así se miden:
* Hormonas peptídicas: T3, T4, TSH, GH...Casi todas las hormonas hipofisarias.
* Hormonas no peptídicas: Estrógenos, testosterona...Hormonas sexuales.
* Sustancias no hormonales que pueden considerarse comoantígenos: Marcadores tumorales digoxina, medicamentos.
* RESUMEN.
* Se describen diversos procedimientos utilizados
* para manejar datos de radioinmunoanálisis (RIA) y
* se presentan las bases del ventajoso y sencillo enfoque
* del Dr. Grafton Chase para el mismo fin. Entre las
* principales características de éste destacan el sistema
* interno de control de calidad quecontiene, además
* de que no oculta errores experimentales pues no
* comprime las escalas de la curva de calibración, a la
* vez que permite identificar puntos sospechosos en
* ésta. Se comentan factores importantes del RIA
* relacionados con el manejo de los datos, como son
* las diferencias entre el RIA en equilibrio y el RIA
* secuencial, el concepto de sensibilidad delanálisis, la
* especificidad del anticuerpo y la conveniencia de
* verificar la calidad del ensayo utilizando los patrones
* mismos con que se construye la curva de calibración
* en vez de emplear controles. Se presentan ejemplos
* con datos típicos proporcionados por fabricantes de
* reactivos y con datos obtenidos en el laboratorio.
* También se describe la aplicacióndel procedimiento
* del Dr. Chase al análisis inmunorradiométrico.
* (Rev Biomed 2002; 13:277-287)
Solicitud de sobretiros: Q.F.B. Jorge H. Alvarez-Cervera, Laboratorio de Radioinmunoanálisis, Calle 3 No. 399 entre 1 y 6, Col. Díaz Ordaz,
C.P. 97130, Mérida, Yucatán, México.
* Recibido el 12/Julio/2001. Aceptado para publicación 18/Octubre/2001
* Este artículo está disponible enhttp://www.uady.mx/~biomedic/rb021337.pdf
En este ensayo se incorpora una reacción de enlace competitivo, en la que una cantidad fija de antígeno marcado radiactivamente y antígeno de la muestra compiten por un número limitado de sitios de enlaces específicos con el anticuerpo. La unión de los dos antígenos con el anticuerpo forma un complejo precipitable. El porcentaje de antígeno marcado quese precipitadisminuye a medida que la concentración de antígeno no marcado en la muestra aumenta. Por tanto, la concentración de antígeno en la muestra problema es inversamente proporcional a la cantidad de radioactividad de la fracción enlazada.
Sea antígeno (Ag) la sustancia que quiere medirse, Ag* la misma sustancia que contiene en su molécula un isótopo radioactivo y el anticuerpo (Ac)que reacciona específicamente con los anteriores y que se encuentra en una cantidad insuficiente para unir todas las moléculas de antígeno presente. Si se incuba una muestra que contenga Ag, Ag* y Ac, los dos Ag y Ag* compiten por su unión con Ac.
Tras producirse la reacción, se separan los antígenos unidos (Ag-Ac, Ag*-Ac) de los libres Ag*, Ac). Una vez separados se mide la radioactividad delas fracciones unida y libre. Utilizando curvas de calibración obtenidas con patrones de los que se conoce la concentración de Ag, es posible mediante la relación entre el Ag libre y unido calcular la concentración de Ag en la muestra problema.
Los métodos de separación del Ag libre y unido pueden agruparse en tres tipos:
* Método de adsorción
El Ag libre se retiene superficialmente en...
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