reacción de aglutinación

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A2 REACCIÓN DE AGLUTINACIÓN
En las técnicas de grupos sanguíneos eritrocitarios las reacciones
más importantes son las de aglutinación. Los antígenos situados en
la membrana de los hematíes reaccionan con los anticuerpos y el
resultado es la formación de aglutinados. Las determinaciones de
antígenos del glóbulo rojo y el estudio de anticuerpos en suero se
basan principalmente en laaglutinación de los hematíes, aunque en
ocasiones la unión antígeno/anticuerpo que activa la vía clásica del
sistema del complemento puede ser detectada por una hemólisis «in
vitro».

Los

anticuerpos

de

hemolíticos son: anti-A, anti-B,

grupo

sanguíneo

anti- Lea,

esencialmente

anti-Vel,

anti-Tja y

anti- Jkb.

Molécula IgM

Hematíes aglutinados por una IgM

Un factor muy importante es el tipo deinmunoglobulina a que
pertenecen los anticuerpos reaccionantes. Si los anticuerpos son
del tipo IgM la aglutinación se produce directamente. Por su
tamaño molecular y la distribución de los lugares de reacción con los
antígenos, pueden unirse fácilmente con varios hematíes y producir
su aglutinación.

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La sensibilización de hematíes por anticuerpos de tipo IgG,
generalmente

no

puede

produciraglutinación.

Existen

excepciones que están relacionadas al número y al grado de
exposición de las determinantes antigénicas como las aglutininas del
ABO, anti-D frente a glóbulos con fenotipos - - D - -, ccDee.
La molécula de IgG es demasiado pequeña para unirse a más de un
hematíe a no ser que se introduzca alguna modificación del medio de
reacción.

Molécula IgG

Hematíes sensibilizados pormoléculas de IgG

La distancia que han de salvar los anticuerpos para producir
aglutinación es la que guardan entre sí los hematíes en suspensión
en su propio suero o plasma o en un medio salino isotónico, distancia
que viene impuesta por las fuerzas de repulsión existentes entre los
hematíes. La teoría aceptada para explicar este hecho es la del
potencial Zeta.
La superficie de los hematíes tienecargas eléctricas negativas
debidas a los carboxilos del ácido siálico de la membrana. Si los
hematíes están en suspensión en un medio que contiene iones
libres, los cationes forman una envoltura de cargas positivas

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alrededor de aquéllos convirtiéndolos en partículas cargadas de
electricidad, del mismo signo, que experimentan una fuerza de
repulsión entre ellas. Esta fuerza de repulsión sedenomina potencial
Zeta.

El potencial Zeta puede ser disminuido por el aumento de la
constante dieléctrica del medio mediante la adición de sustancias
macromoleculares (albúmina bovina, etc.) y por la disminución de las
cargas negativas de los hematíes mediante la acción de enzimas
proteolíticas. Es decir, podemos disminuir la distancia entre los
hematíes favoreciendo la aglutinación de los mismos.

A2.1 ETAPAS DE LA AGLUTINACIÓN
La aglutinación se produce en dos etapas:
la primera es la unión antígeno - anticuerpo y
la segunda la formación de puentes intercelulares que
producen el fenómeno visible de la aglutinación.

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Primera etapa
Está influenciada por las siguientes variables:
Temperatura: cada sistema antígeno/anticuerpo tiene una
temperatura óptima. Las IgM reaccionan mejor a 4ºC ylas IgG a
37ºC.
Afinidad entre Ag y Ac.
pH: el óptimo es entre 6.5 y 7.6.
Concentración relativa del antígeno y del anticuerpo. Puede
ocurrir ausencia o disminución de aglutinación con grandes
cantidades de anticuerpo o antígeno; situación denominada
“fenómeno de prozona y postzona” respectivamente y que
puede llevar falsos negativos o reacciones débiles. Con grandes
concentraciones de Ac existemayor probabilidad de que los dos
sitios de unión al Ag se unan a determinantes en una misma
célula. Ante el exceso de antígeno la situación es similar.

Exceso de Ac
PROZONA

Equilibrio

Exceso de Ag
POSTZONA

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Fuerza iónica del medio. Al disminuir la fuerza iónica del medio,
disminuye la nube de iones que rodea a los hematíes
favoreciendo la unión Ag-Ac.
Tiempo de incubación: es el tiempo...