Reaccion Acido Nitrico Con Carbon Activado

Efecto del ácido cítrico y del carbón activado en la regeneración de plantas de orquídeas (Laelia lundii) por cultivo in vitro de semillas

Díaz L. P.1,Namur J .J.1 y Bollati S.A 1
1Lab. de Cultivo de Tejidos Vegetales. Cát. Caña de Azúcar. Fac. Agr. y Zootecnia. U.N.T. C.C. 125 (4000) S. M. de Tucumán. R.A.
E-mail: ldiaz@faz.unt.edu.ar

Introducción

El género Laelia Lindl tiene 53 especies ysolamente Laelia lundii está representada en la flora nativa de la Argentina, localizada en Misiones (Iguazú ) y Salta (Jonson, 2001). Es una epifita mediana, con inflorescencia apical de 1 a 2 flores erguidas, con sépalos y pétalos blancos, carnosos, delgados y recurvos. El labelo es trilobado, blanco con nervaduras violáceas y base amarilla (Johnson, 2001).
Debido a las continuas extraccionesa que se ve sometida por su valor ornamental, se hace necesaria la búsqueda de métodos de conservación de germoplasma, la formación de bancos in vitro y la obtención de protocolos de micropropagación.
La germinación in vivo como el desarrollo posterior de la plántula dependen de la relación simbiótica con un hongo; sus semillas son pequeñas y contienen poca o ninguna reserva alimenticia, lo quedificulta la supervivencia de las mismas. En la siembra in vitro es posible prescindir del hongo sustituyendo su acción por un medio nutritivo de cuya elección adecuada depende la germinación de la mayor cantidad de semillas (Pierik, 1980). No se conocen referencias bibliográficas sobre la propagación y la conservación in vitro de esta especie.
Cuando se cultiva in vitro, la oxidación fenólica(Jiménez González, 1998) puede ocasionar serios problemas en el establecimiento y supervivencia de los explantes de la mayoría de las especies. Según Preece y Compton (1991) y Hu y Wang (1983) citados por Jiménez González (1998), cuando los tejidos son dañados se liberan compuestos fenólicos, que se manifiestan con un ennegrecimiento del medio de cultivo alrededor del explante y que se puede extendera todo el medio, provocar daños al crecimiento y hasta la muerte del explante.
Una de las prácticas más comunes para contrarrestar el efecto de la oxidación fenólica, es agregar antioxidantes al medio de cultivo, los que son inhibidores de la polifenoloxidasa o adsorbentes. Entre los más empleados se pueden citar los ácidos ascórbico, cítrico y málico y carbón activado. Thorpe et al. (1991)recomiendan la adición de carbón activado, de 0.1- 5 %, en el medio de cultivo para evitar los efectos de la oxidación de los explantes. En general se usa para adsorber compuestos tóxicos de la microatmósfera gaseosa o los reguladores de crecimiento en exceso que están presentes en el medio de cultivo.
El presente trabajo surge como consecuencia de la falta de desarrollo de los explantes cuando lassemillas de Laelia lundii se incubaron inicialmente, debido al oscurecimiento del medio de cultivo. Por lo que fue necesario analizar la influencia del ácido cítrico y del carbón activado como sustancias antioxidantes en el cultivo in vitro de semillas de Laelia lundii, a fin de optimizar la composición del medio de cultivo para su micropropagación y posterior conservación.

Materiales ymétodos

Se realizó el cultivo de semillas de Laelia lundii en medio Murashige y Skoog (MS1) (1962) con sales a la mitad de la concentración, sacarosa (30 g/l), agar (5 g/l) previa desinfección superficial del fruto inmaduro en hipoclorito de sodio al 30%, 20 minutos. En el primer subcultivo, 210 días después de la siembra, se seleccionaron plantas entre 0,5 y 1,2 cm de altura, con 2-3 raíces y 3 a 5hojas. Se colocaron 20 plantas por frasco y 4 frascos / tratamiento en MS1. Los tratamientos fueron: A) ácido cítrico: L1: 50 mg/l, L2: 70 mg/l y L3: 90 mg/l. B) carbón activado (CA): L4: 1 g/l y L5: 2 g/l. C) Testigo: sin antioxidantes. Las evaluaciones de altura (desde el cuello de la planta al extremo de la hoja más larga) y longitud de raíces se realizaron a 300 (F1) y 450 días (F2). Se usó...