reaccion hill
Páginas: 3 (711 palabras)
Publicado: 22 de junio de 2013
Reacción de Hill
INTRODUCCION
Dentro de las membranas internas del cloroplasto, también llamadas tilacoides se encuentran los pigmentos encargados de absorber la luz en la fotosíntesis, que a suvez son los componentes de los fotosistemas.
Cada membrana tilacoidal contiene dos fotosistemas que se encuentran conectados por una serie de transportadores de electrones. El flujo de electrones através de esta cadena de transporte electrónico se conoce como transporte no cíclico y es responsable de la reducción del NADP+ a NADPH.
La reacción de Hill se refiere a la primera etapa de lafotosíntesis, que depende directamente de la luz o energía luminosa para poder obtener energía química en forma de ATP y NADPH, a partir de la disociación de moléculas de agua, formando oxígeno e hidrógeno ydel flujo de electrones.
OBJETIVO
Confirmar la existencia de un transporte de electrones en la membrana del cloroplasto sometiendo dicha membrana a diferentes situaciones que alteren el mismo.ACTIVIDAD 1: Obtención de cloroplastos
Se pesaron 50g de acelga (Beta vulgaris var. Cycla) previamente lavada a la cual se la proceso junto con 250 ml de buffer de extracción (Tris-HCL 20 mM, pH7,2 mM MgCl2, 330mM sacarosa) hasta obtener un preparado de aspecto liquido de un verde intenso. A este preparado se lo dejo filtrar utilizando un algodón y se recogieron cuatro fracciones de lamuestra en tubos Falcon.
Una vez obtenidas las cuatro fracciones se las llevo a una centrífuga durante 10 minutos a 3000 rpm.
Luego de la centrifugación se descarto el sobrenadante obteniéndose el pellet(cloroplastos) en la parte inferior del tubo, el pellet fue resuspendido con el buffer de extracción.
ACTIVIDAD 2: Ensayo de reacción
Para el siguiente ensayo fueron utilizados: Bufferfosfato (100mM, pH 6,5); Colorante (solución 0,25mM de la sal sódica del 2,6- diclorofenol-indofenol) y Detergente (solución de Triton X100 al 5%).
Fueron preparados 6 tubos:
Una vez concluido el...
INTRODUCCION
Dentro de las membranas internas del cloroplasto, también llamadas tilacoides se encuentran los pigmentos encargados de absorber la luz en la fotosíntesis, que a suvez son los componentes de los fotosistemas.
Cada membrana tilacoidal contiene dos fotosistemas que se encuentran conectados por una serie de transportadores de electrones. El flujo de electrones através de esta cadena de transporte electrónico se conoce como transporte no cíclico y es responsable de la reducción del NADP+ a NADPH.
La reacción de Hill se refiere a la primera etapa de lafotosíntesis, que depende directamente de la luz o energía luminosa para poder obtener energía química en forma de ATP y NADPH, a partir de la disociación de moléculas de agua, formando oxígeno e hidrógeno ydel flujo de electrones.
OBJETIVO
Confirmar la existencia de un transporte de electrones en la membrana del cloroplasto sometiendo dicha membrana a diferentes situaciones que alteren el mismo.ACTIVIDAD 1: Obtención de cloroplastos
Se pesaron 50g de acelga (Beta vulgaris var. Cycla) previamente lavada a la cual se la proceso junto con 250 ml de buffer de extracción (Tris-HCL 20 mM, pH7,2 mM MgCl2, 330mM sacarosa) hasta obtener un preparado de aspecto liquido de un verde intenso. A este preparado se lo dejo filtrar utilizando un algodón y se recogieron cuatro fracciones de lamuestra en tubos Falcon.
Una vez obtenidas las cuatro fracciones se las llevo a una centrífuga durante 10 minutos a 3000 rpm.
Luego de la centrifugación se descarto el sobrenadante obteniéndose el pellet(cloroplastos) en la parte inferior del tubo, el pellet fue resuspendido con el buffer de extracción.
ACTIVIDAD 2: Ensayo de reacción
Para el siguiente ensayo fueron utilizados: Bufferfosfato (100mM, pH 6,5); Colorante (solución 0,25mM de la sal sódica del 2,6- diclorofenol-indofenol) y Detergente (solución de Triton X100 al 5%).
Fueron preparados 6 tubos:
Una vez concluido el...
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