REACCIONES CARACTERÍSTICAS DE AMINOÁCIDOS Y PROTEÍNAS

Practica No 4

REACCIONES CARACTERÍSTICAS DE AMINOÁCIDOS Y PROTEÍNAS

OBJETIVO
Identificar a los aminoácidos y a las proteínas a través de sus reacciones
características.

ANTECEDENTES
Los aminoácidos van a representar las reacciones características de sus grupos
carboxilo, alfa-amino y R; van hacer las reacciones típicas de los grupos R las que nos
van a permitir diferenciar entre losaminoácidos. No todos los grupos R de los
aminoácidos presentan reacciones típicas; algunas de estas son:
Reacción de la ninhidrina: Positiva para todos los grupos alfa-amino.
Reacción de Biuret: Color azúl producido por moléculas con dos o más enlaces
peptídicos.
Reacción de Millon: Color rojo al reaccionar con la tirosina.
Reacción de Satin: Específica para la prolina e hidroxiprolina.Reacción de Sakaguchi.: Para la arginina.
Reacción de Pauli: Para la histidina y tirosina.
Reacción Xantoproteica: Color amarillo con la fenilalanina, tirosina y triptófano.
Reacción de Hopkins-Cole: Específica para el triptófano.
Reacción de la Vainilina: Para identificar el triptófano.
Estas reacciones coloridas también pueden aplicarse a proteínas, y sirven para
detectar la presencia de unaminoácido en particular. Las proteínas también van a
presentar una serie de reacciones de precipitación, que en última instancia van a
reflejar su composición de aminoácidos y las interacciones que existen entre ellos en la
molécula.
Debido a la gran complejidad de las proteínas, la precipitación se debe a
diferentes factores en cada caso, pero predomina el efecto del pH en la ionización delos grupos R, la constante dieléctrica del solvente usado y su efecto sobre los grupos
polares, la alteración de la estructura terciaria por calentamiento, cambios en la fuerza
ionica del solvente por adición de sales, y reacción de algunos aminoácidos con
metales pesados.

La estructura terciaria de las proteínas puede conservarse al precipitarla con
sales, pero los otros agentes queinducen la precipitación, por lo general, alteran
mucho la estructura terciaria, desnaturalizando a las proteínas.

MATERIAL Y REACTIVOS
20 tubos de ensaye medianos
Gradilla
Pipetas de 5.0 ml
Mechero
Pipetas graduadas de 10.0 ml
Soluciones de proteínas y aminoácidos
Soluciones de reactivos para cada prueba
PROCEDIMIENTO
a) Pruebas coloridas para aminoácidos :
Se va a efectuar cada una deellas con las seis soluciones de tirosina, triptófano,
cisteína y prolina. Cada solución se preparara pesando 0.02 g
de aminoácidos y
se disuelven en 3 ml de agua destilada.
1) Reacción de Biuret:
A porciones de 3 ml de cada solución problema, agregar 2 ml de NaOH al
10 % y de 3 a 5 gotas de sulfato de cobre al 0.5 %, mezclar bien y observar si se
forma un color violeta o un precipitado.Si no se presenta reacción inmediata,
dejar reposar 10 a 15 minutos y observar.
2) Reacción Xantoproteica:
A porciones de 2 ml de cada solución problema, agregar 1 ml de HNO3
concentrado y calentar cuidadosamente (de preferencia en la campana).
Observe si hubo algún cambio en el color; enfrie bien y estratifique
cuidadosamente con unas gotas de NH4OH concentrado. Observe si se forma
un coloranaranjado en la interfase.
3) Reacción de Millon:
A porciones de 3 ml de las soluciones problema, agregar de 2 a 5 gotas
del reactivo de Millon, y caliente en baño maría. La formación de un color rojo
indica que es positiva la prueba. El reactivo de Millon es muy venenoso y
corrosivo.

4) Prueba para el azufre:
A porciones de 3 ml de cada solución problema, agregar 2 ml de NaOH al
40 %y caliente suavemente. Añada de 5 a 10 gotas de acetato de plomo y
caliente nuevamente, observando si existe formación de un precipitado negro de
PbS.
5) Reacción de la ninhidrina:
A porciones de 3 ml de las soluciones problemas, agregue 5 gotas de
piridina y 0.5 ml de solución de ninhidrina al 0.1 % calentando en baño María por
10 min.
6) Reacción de Hopkins-Cole:
A porciones de 2 ml...