REACCIONES GENERALES DE LAS PROTEINAS

UNIVERSIDAD TECNOLÓGICA DE PEREIRA. FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD.
PROGRAMA DE MEDICINA. PRIMER SEMESTRE.
LABORATORIO DE BIOQUÍMICA. PRACTICA No. 9
REACCIONES GENERALES DE LAS PROTEINAS
Diego Alejandro Cortes-Mejía (96052220502); Estefanía Gutiérrez-Ocampo (1094941173);
Juan Fernando Henao-Martínez (97101904125); Laura Daniela Gutiérrez-Rodas (1094952714)
Abril 8 del 2014
Profesor:Vicente Honorio Cediel Collazos, Mg. egutierrez19@utp.edu.co

RESULTADOS.
1. Prueba de Biuret para enlaces peptídicos

Albúmina
Al agregar 5 gotas de CuO4 a 2 mL de Albúmina, la mezcla se torna de una coloración blanca-gris. Cuando se le agrega a dicha sustancia 2 mL de NaOH 2M la mezcla se tiñe de un color violeta claro de consistencia viscosa semejante al aceite. Es una reacciónexotérmica.
Caseína
Al agregar 5 gotas de CuO4 a 2 mL de Caseína, la mezcla se tiñe de un color violeta-azul. Cuando se le agrega a dicha sustancia 2 mL de NaOH 2M se produce una reacción exotérmica y el compuesto toma una coloración violeta más clara que la albumina.

Gelatina

Al agregar 5 gotas de CuO4 a 2 mL de gelatina, la mezcla toma una coloración violeta claro. Cuando se le agrega a dichasustancia 2 mL de NaOH 2M se produce una reacción exotérmica y la coloración violeta se intensifica.

Glutatión

Al agregar 5 gotas de CuO4 a 2 mL de Glutatión la mezcla toma un color blanco-gris de consistencia turbia. Al adicionarle 2 mL de NaOH 2M se torna traslucido y al agitarlo la coloración se vuelve amarilla.




2. Desnaturalización por calor y pH extremos

Se añadieron 5 mLde una proteína a tres tubos de ensayos, luego se agregaron 0.5 mL de HCl 1M a uno, a otro 0.5 mL de NaOH 1M y al tercero 0.5 mL de agua. Después fueron expuestos al calor en un baño de agua hirviendo durante 10 minutos y luego enfriados a temperatura ambiente. Se observaron los resultados. Por último se ajustaron los tubos ácidos y alcalinos hasta la neutralidad. Estos fueron los resultados:Albumina
Caseína
Gelatina
Glutatión
HCl
Después del calor, solución turbia, con pH=1. Es neutralizado con 7 gotas de NaOH 1M.
Después del calor se torna blanca la solución, pH=2. Es neutralizado con 2 gotas de NaOH 1M.
Después del calor se mantiene casi incolora, con pH=2. Es neutralizado con 12 gotas de NaOH 1M.
Después del calor se mantiene casi incolora, con pH=2. Es neutralizado con10 gotas de NaOH 1M.
NaOH
Después del calor, solución turbia, con pH=14. Es neutralizado con 9 gotas de HCl 1M.
Después del calor solución es blanca, con pH=14. Es neutralizado con 12 gotas de HCl 1M.
Después del calor solución casi incolora, con pH=10. Es neutralizado con 8 gotas de HCl 1M.
Después del calor, solución casi incolora, con pH=14. Es neutralizado con 8 gotas de HCl 1M.
AguaDespués del calor, solución turbia, con pH=9. Es neutralizado con 1 gota de HCl 1M.
Después del calor, solución blanca, con pH=14. Es neutralizado con 7 gotas de HCl 1M.
Después del calor, solución casi incolora, con pH=8. Es neutralizado con 1 gota de HCl 1M.
Después del calor, solución casi incolora, a pH neutro.


3. Precipitación por metales pesados

Albúmina

Al agregar 5 gotas deCuSO4 a 2mL de Albúmina, se produce una mezcla azulada de consistencia turbia, es decir, con pequeños solidos suspendidos en el compuesto. Al agregar un exceso de reactivo aumenta la tonalidad azulosa y los sólidos suspendidos se agrandan y precipitan al fondo del tubo de ensayo, formando dos fases.

Caseína

Al agregar 5 gotas de CuSO4 a 2mL de Caseína, se produce una mezcla violeta conpequeños solidos suspendidos dentro de la misma. Con un exceso del reactivo los sólidos se agrandan y precipitan, formando dos fases.

Gelatina

Al agregar 5 gotas de CuSO4 a 2mL de Gelatina, la tonalidad se torna un poco azulosa, pero no deja de ser traslucida. Con un exceso aumenta la tonalidad y se ven pequeños gránulos dentro de la sustancia.

Glutatión

Al agregar 5 gotas de CuSO4 a 2mL...