Reactivos En Leche
CNBr / Azul de Coomasie / 6N.HCl @ 90°C /b-mercaptoetanol / Ninhidrina / Tripsina / Fenilisotiocianato / Quimotripsina / dodecil sulfato (SDS) / Bisacrilamida / Iodoacetamida o ácido perfórmico
Elija de esta lista los reactivos que emplearía enlos siguientes casos y diga cómo emplearía cada uno de ellos para dicho propósito.
a) Se desea determinar el peso molecular de las subunidades de una proteína mediante un técnica electroforética.
b)Se desea cortar una proteína en fragmentos pequeños para poder estudiarla.
c) Se desea degradar una polipéptido de la proteína en sus componentes aminoacídicos para luego analizar la proporción que lacadena estudiada contiene de cada uno de ellos.
d) Se desea obtener la secuencia de aminoácidos de uno de los péptidos obtenidos a partir de la digestión de una proteína.
Problema 2.- En unaelectroforesis desnaturalizante (según Laemmli) se obtuvieron las movilidades relativas siguientes:
Ovoalbúmina, 0.39; b-lactoalbúmina, 0.46; Mioglobina, 0.66; Lisozima, 0.58.
De acuerdo con los datosde la tabla 1 calcule el peso molecular de la lisozima.
Problema 3.-Un investigador estaba tratando de purificar la acetilcolinesterasa de cerebro de rata por medio de diversas técnicas. Él reportósus datos en la siguiente tabla pero omitió calcular algunos valores útiles.
a) Complete la tabla agregando las columna de actividad específica y el rendimiento obtenido luego de cada paso de lapurificación.
b) Analize los resultados de la tabla y, tomando en cuenta aquellos pasos que no contribuyeron a la purificación, sugiera mejoras al procedimiento.
c) explique el razonamiento que apoyasus propuestas.
Problema 4.- A que pH sería más eficaz una electroforesis nativa (sin desnaturalizantes) de las siguientes mezclas de proteínas: a) Seroalbúmina y Hemoglobina; b) mioglobina y...
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