Reconocimiento De Aa

COAGULACIÓN DE PROTEÍNAS “DESNATURALIZACIÓN”.
Fundamento:
Las proteínas, debido al gran tamaño de sus moléculas, forman con el agua soluciones coloidales. Estas soluciones pueden precipitar con formación de coágulos al ser calentadas a temperaturas superiores a los 700 C o al ser tratadas con soluciones salinas, ácidas, básicas, alcoholes, etc.
La coagulación de las proteínas es un procesoirreversible y se debe a su desnaturalización por los agentes indicados, que al actuar sobre la proteína la desordenan por la destrucción de su estructura terciaria y cuaternaria.
Materiales:
* Tubos de ensayo.
* Gradillas.
* Pipetas pasteur.
* Baño maría.
* Cronómetro.
* Albúmina (muestra 1).
* Clara de huevo (muestra X).
* Ácido clorhídrico, metanol, hidróxidosódico al 40%, cloruro sódico al 20%, acetona.
Procedimiento:
1. Cogemos 6 tubos de ensayo por cada muestra, 1 y X, y colocamos 1 ml de muestra en los tubos.
2. Introducir el tubo 4 de cada muestra en el baño maría durante 10 minutos a 1000 C.
3. Añadir al resto de los tubos 1 ml de cada reactivo. (los tubos 1 y 2 se montaran por duplicado).
4. Mezclar y leer.
Tubos | 1 acetona | 1metanol | 2 HCl | 2 NaOH | 3 NaCl | 4 tª |
v. muestra | 1 ml | 1 ml | 1 ml | 1 ml | 1 ml | 1 ml |
v. reactivo | 1 ml | 1 ml | 1 ml | 1 ml | 1 ml | - |

Resultados:
* Muestra 1:
* Tubo 1 (acetona): Positiva. Al añadir el reactivo se produce un cambio en la muestra instantáneamente. Se vuelve turbia y blanquecina. Esto significa que la acetona afecta a las proteínas que contiene lamuestra.
* Tubo 1 (metanol): Negativo. Al añadir el reactivo no ocurre nada, esto puede ser debido a la evaporación del metanol.

* Tubo 2 (HCl): Positivo. Al añadir el reactivo se produce un cambio en la muestra instantáneo. Se vuelve blanquecino y turbio y, además, se forman coágulos al fondo del tubo. Esto significa que la proteína se hadesnaturalizado por la acción del ácido. Esta reacción es reversible, ya que las proteínas en medio ácido se comporta como una base.
* Tubo 2 (Na OH 40%): Positivo. Al añadir reactivo, al principio no pasaba nada. Al dejarlo unos minutos comenzó a formarse en la superficie coágulos. Conforme más tiempo lo dejábamos, los coágulos ocupaban toda la muestra e incluso cambió de color, tomando unatonalidad amarillenta. Finalmente, los coágulos se concentraron en la superficie del tubo y el color amarillento se mantuvo. Esto significa que la proteína se ha desnaturalizado por la acción de la base. Esta reacción es reversible, ya que las proteínas en medio básico se comporta como un ácido.

* Tubo 3 (Na Cl 20%): Negativo. Al añadir el reactivo no ocurre nada. Esto puede ser debido aque el tiempo de exposición ha sido muy breve, ya que para que una sal afecte a una proteína tiene que estar 24 horas en agitación. La sal secuestra el agua de las proteínas.
* Tubo 4 (temperatura): Positivo. Al sacar la muestra del baño se observan en las paredes una sustancia de aspecto gelatinoso. Esto significa que la proteína se ha desnaturalizado. En este caso la reacción esirreversible.

* Muestra X:
* Tubo 1 (acetona): Positivo. Al añadir el reactivo se produce un cambio en la muestra instantáneamente. Se vuelve turbia y blanquecina. Esto significa que la acetona afecta a las proteínas que contiene la muestra.
* Tubo 1 (metanol): Positivo. Al añadir el reactivo se produce un cambio en la muestra al instante. Sevuelve turbia y blanquecina. Esto significa que el metanol ha alterado a las proteínas contenidas en la muestra.

* Tubo 2 (HCl): Positivo. Al añadir el reactivo se produce un cambio en la muestra instantáneo. Se vuelve blanquecino y turbio y, además, se forman muchos más coágulos al fondo del tubo que en la muestra 1. Esto significa que la...