Recuento De Bacterias

Fecha de elaboración: 09/03/13
Fecha de entrega: 11/03/13
Introducción
  Los microorganismos están ampliamente distribuidos en la naturaleza, por lo que siempre se encuentran presentes en diversos productos, especialmente en aquellos que favorecen de algún modo su sobrevivencia o desarrollo.
Los alimentos por su producción primaria, generalmente tienen una importante microbiota “normal”,según la región y condiciones en que se producen; además, su composición tiende a conservar dicha flora y, por supuesto, le proporciona nutrientes de manera que, si las condiciones lo permiten, los microorganismos pueden multiplicarse en los alimentos. Como consecuencia de este desarrollo microbiano, los alimentos pueden deteriorarse y perder sus atributos.
Además de la microbiota normal, losalimentos son susceptibles de contaminación durante su manejo, ya sea por operadores, equipo, fauna nociva, o por contaminación cruzada; algunos de los microorganismos contaminantes pueden ser patógenos y en tal caso, su desarrollo e incluso su mera sobrevivencia, pueden ocasionar desde el incumplimiento de normas de higiene y seguridad, hasta la aparición de enfermedades transmitidas por alimentos.Dado el tamaño de las poblaciones microbianas que pueden estar presentes en un alimento, que van desde algunos miles hasta varios millones de células por gramo, su determinación cuantitativa requiere la preparación de diluciones conocidas de la muestra; y es costumbre utilizar cifras decimales para facilitar los cálculos. En esta práctica se establece la forma general de preparar dichas diluciones.En vista de la gran cantidad de productos alimenticios y de la diversidad de sus características, algunos pueden requerir modificaciones o métodos específicos pero, en todos los casos donde sea posible, se recomienda apegarse a estas guías y modificarlas únicamente cuando sea necesario.
Objetivo
* Establecer la cuenta de bacterias mesofilicas aerobias de una muestra de alimento determinado ycomparar con la norma.
* Realizar la preparación y diluciónde homogenizados de alimentos.
* Aprender a expresar resultados según cada método utilizado.

Materiales
Alimento con carne de res, de puerco, de pollo, licuados, yogurt casero, pan casero, agua fresca, jamón, queso etc.
Licuadora estéril.
Balanza.
Espátula.
1 frasco con 90 ml de solución de fosfato estéril.
4 tubos contapa con 9ml de solución de fosfatos estéril cada uno.
4 pipetas estériles de 1ml.
1 pipeta estéril de 10 ml.
6 cajas Petri estériles (1 se emplea para pesar la muestra).
5 tubos con 15 ml de agar estéril para métodos estándar c/u.

Procedimiento.
Se nos dieron las indicaciones correspondientes para la práctica, limpiamos nuestra mesa, comenzamos con el etiquetado de las cajas petri, defrascos y de las pipetas estériles. Encendimos el mechero, homogenizamos la muestra batiendo muy bien el yogurt Vaciamos todo el contenido al vaso de la licuadora, con mucho cuidado colocamos las cuchillas y colocamos el vaso en el motor de la licuadora.
Licuar durante 1 minuto y luego dejamos reposar el vaso durante aproximadamente 5 minutos hasta que se formen una capa en la parte superior.Imagen 1.1En seguida hicimos disolucionesprogresivas de la 10-2 hasta la 10-5.

Después en las cajas petri vaciamos 1ml de cada dilución, después que nos proporcionaron el Agar, lo dejamos enfriar hasta que pudiéramos tocarlo sin quemarnos y lo vaciamos en cantidad similar en las cajas petri, lo revolvimos un poco y esperamos a que solidificara la dilución y el Agar juntos.
Dejamos las cajaspetri en el laboratorio para que las incubaran de 35-37°C durante 24 y 48 hrs y fuimos al día siguiente a contar las colonias y al siguiente a contar de nuevo.
Imagen 1.2 Agar

Imagen 1.3 Recuento de placa
 Lectura de colonias en las placas:
- Ordenamos de forma decreciente las placas (10-4, 10-3, 10-2 y 10-1).
- Contamos el número de colonias en placa que permita hacerlo, en este caso...