Recuperacion Antigenica

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
ESCUELA PROFESIONAL DE TECNOLOGÍA MÉDICA
Descalcificación, cortes por congelación, recuperación antigénica dilución y conservación de los anticuerpos


Cátedra: Inmunohistoquimica

Docente: Altemira Montalvo C.

Integrantes: Núñez Herrera Elvis
Ramírez CastroJosé Luis
Ramos Días Anderson


Ciclo: VI

DECALCIFICACIÓN
1. Introducción:
Se denomina decalcificación a la completa eliminación de las sales Calcio presentes en los tejidos tras haber realizado su fijación. Éste procedimiento se realiza de forma sistemática sobre tejidos mineralizados (dientes y huesos= yesporádicamente sobre material anatomopatológico con calcificaciones que puedan dificultar o impedir la observación al microscopio. Solo está desaconsejado decalcificar el tejido en las enfermedades óseas metabólicas donde nos interesa valorar el equilibrio entre síntesis y destrucción de matriz ósea y su grado de calcificación. En éste último caso utilizaríamos un microtomo motorizado específico paratejidos duros.
2. Decalcificación química:
Los principales agentes decalcificadores están formados por ácidos fuertes o débiles empleados solos o en conjunción a distintos líquidos fijadores. Los principales reactivos que se utilizan son ácidos inorgánicos fuertes como el ácido nítrico o el clorhídrico y débiles como el ácido sulfuroso y también ácidos orgánicos como el ácido fórmico el acético yel tricloroacético. Todas estas sustancias tiene la ventaja de ser estables, baratas y de fácil disponibilidad.
Un líquido decalcificante ideal debe reunir una serie de cualidades. Estas cualidades son las siguientes:
1. Debe producir una eliminación completa de los depósitos cálcicos.
2. No debe provocar efectos indeseables o artefactos sobre los tejidos tratados.
3. No interferir con losprocedimientos de tinción que se emplean posteriormente.
El agente mas rápido y eficaz es el acido nítrico y se emplea en soluciones del 5 al 7.5%. El problema que tiene es que utilizado a concentración elevada, por encima del 6% es que tiende a producir gran destrucción tisular que se atenúa en disolución alcohólica.
Ácido clorhídrico: no es tan rápido como el nítrico pero produce menor agresióntisular y no precisa lavado post-decalcificación.
Los ácidos orgánicos: producen escasos artefactos titulares y apenas interfieren en los resultados finales de la tinción pero actúan muy lentamente y requieren la renovación frecuente del líquido decalcificante. Por eso están indicados exclusivamente cuando la muestra es tejido óseo esponjoso y contiene solo pequeñas espículas calcificadas.
En elproceso de decalcificación hay que seguir unas normas que son:
1. Para disminuir en lo posible los efectos alterativos decalcificador, la fijación debe haberse completado antes de iniciar el proceso.
2. La concentración del agente decalcificante debe ser óptima con un volumen de líquido decalcificador mínimo de 1/20 que debe ser renovado con frecuencia.
3. Para acelerar el proceso los bloquesdeben ser suspendidos en el centro del recipiente porque en el fondo se acumula mayor concentración de sales cálcicas.
4. La temperatura ideal para realizar la decalcificación se encuentra en torno a los 25ºC. Por encima de ésta temperatura el proceso de decalcificación se acelera pero también lo hace el de descomposición del tejido.
5. La agitación suave ya sea manual o mecánica generalmenteacelera el proceso.
6. A veces la adicción de alguna resina de intercambio iónico. Al medio de decalcificación acelera el proceso porque atrapa los iones de Calcio liberados por el decalcificador químico.
7. Después de cualquier proceso de decalcificación química donde se haya empleado ácido, el exceso de éste último ha de ser eliminado mediante lavados en soluciones neutralizantes, lo mejor el...