recursos natrales

Departamento de biología y quimia
Bioquímica vegetal-laboratorio
“Reacciones de coloración de aminoácidos (a.a)”
Presenta a:

Objetivos.
Aplicar pruebas cualitativas y específicas que permitan reconocer grupos químicos de los aminoácidos y proteínas.
Someter soluciones de proteínas a desnaturalización con agentes físicos y químicos.
Evaluar el comportamiento de proteínas y aminoácidosmediante reacciones de coloración.
Realizar determinaciones cuantitativas de proteínas utilizando el método
Colorimétrico de Biuret.
Procedimiento
Experimento Nº 1: REACCION DE NINHIDRINA.
Se tomaron 6 tubos de ensayo limpios, Colocando 10 gotas de 5 a.a de cada una de las soluciones de aminoácidos o proteínas, en diferentes tubos de ensayo

Con una Pipeta graduada limpia, se agrego 1 mlde Solución de Ninhidrina al 0,1% a cada tubo de ensayo se Colocaron los tubos de ensayo en un baño maría por unos 3 minutos, retire los tubos del baño de maría y deje enfriar en la gradilla.
Se anotaron las observaciones y resultados.
EXPERIMENTO Nº 2: REACCION XANTOPROTEICA.
Se tomaron 6 tubos de ensayo limpios, Con una Pipeta Graduada limpia, coloque 10 gotas de cada una de las solucionesde aminoácidos o
Proteínas, en diferentes tubos de ensayo.

Se Agrego con una pipeta graduada, 1 o 2 gotas de HNO3 concentrado en cada tubo, en la campana de extracción. Caliente los tubos en un baño de agua hirviente por 10 minutos; Se Retiraron los tubos del baño y se dejaron enfriar.
Se Agrego lentamente 10ml concentrado en la campana de extracción y
Observo el cambio de color amarillohacia anaranjado en la interface. (pH)
Se anotaron las observaciones y resultados.
EXPERIMENTO Nº 4: REACCION DE MILLON.
se Tomaron 6 tubos de ensayo limpios, Con una Pipeta Graduada limpia, se colocaron 10gotas de cada una de las soluciones de aminoácidos o proteínas, en diferentes tubos de ensayo.

Con una pipeta o con un gotero, se agrego 5 gotas del Reactivo de Millon a cada tubo deensayo.se Calentó los tubos en un baño de agua hirviente por unos 10 min.
se Retire con cuidado los tubos de ensayo del baño de María y colocaron en la gradilla por últimos se anotaron las Observaciones y resultados.
EXPERIMENTO Nº 5: REACCION DE SAKAGUCHI.
Se Tomaron 6 tubos de ensayo limpios, Con una Pipeta Graduada limpia, se coloco 10gotas de cada una de las soluciones de aminoácidos oproteínas, en diferentes tubos de ensayo.

Se Agregue con una pipeta limpia, 10 gotas de Hidróxido de Sodio (NaOH) al 5% a cada tubo de ensayo. Se Agrego con un gotero, 3 gotas de alfa-naftol al 1% a cada tubo de ensayo.
se Agrego con un gotero, 5 gotas de agua de bromo a cada tubo.
Se Anoto las Observaciones y Resultados.
Resultaos
Columna1 Columna2 Columna1 Columna2 ninhirina color xantoproteinaPh leu café oscuro trip amarilla(14) ciste violeta fal incoloro(13) arg amarillo claro leu incoloro(14) pro naranja osuro tir incoloro(13) fen café orina amarilla(14) orina amarillo claro Columna1 Columna2 Columna1 Columna2
nitroprusiato color erlich color
cte rojiso orina amarillo-claro
cti amarillo-claro tip morado
mel amarillo-claro fal amarillo-claro
leu amarillo-claro leu amarillo-claroisl amarillo-claro isl amarillo-claro
orina rojiso urea(+) amarillo-fuerte
Columna1 Columna2
millon color
fal(-) incoloro
leu(-) incoloro
gli(-) incoloro
orina(-) amarillo-lechoso
tir(-) incoloro
fenol(-) incoloro
Columna1 Columna2
sakaguchi color
arg amarillo-trans
gli amarillo-claro
isi amarillo-claro
leu amarillo-rojo
urea amarillo-claro
orina amarillo-claro
glioxilicocapas color
orina (4)azul incoloro
morao amarillo rosa trp (3)amarillo incoloro amarillo Gli 0 incoloro
leu 0 incoloro
isl-fal 0 incoloro
DISCUSION DE RESULTADOS:
La producen los péptidos y las proteínas, pero no los aminoácidos, ya que se debe a la presencia del enlace peptídico (- CO- NH -) que se destruye al liberarse los aminoácidos. Cuando una proteína se pone en contacto con un álcali...